公开(公告)号：CN1818623A

公开(公告)日：2006-08-16

申请号：CN200510011322.7

申请日：2005-02-07

Applicant: 北京大学

Inventor： 张照斌 ,  胡建英 ,  安伟

IPC: G01N21/78 ,  G01N33/50 ,  G01N1/28 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明提供一种青鳉鱼受精卵或幼鱼的DNA鉴定性别的方法，属于鱼类胚胎和早期发育研究领域。该方法包括单个鱼卵或幼鱼的RNA和DNA同步提取技术；用Trizol试剂提取RNA后，剩余有机相中加入DNA提取缓冲液，混匀，50℃－75℃温浴后，低温离心10－15分钟，呈现上下两层，取上层水相加入核酸共沉剂，加入无水乙醇，离心，去除上清，酒精清洗，NaOH溶液溶解，调pH至8.0－8.4，得到单个鱼卵或幼鱼的DNA溶液；将提取的溶液作为模板DNA，加入性别特异PCR引物，进行PCR反应，PCR反应完成后，琼脂糖凝胶电泳检测，如出现目的条带为XY型雄鱼，未出现该条带为XX型雌鱼。本发明鉴定准确性高、效果显著。

公开(公告)号：CN100478675C

公开(公告)日：2009-04-15

申请号：CN200510011322.7

申请日：2005-02-07

Applicant: 北京大学

Inventor： 张照斌 ,  胡建英 ,  安伟

IPC: G01N21/78 ,  G01N33/50 ,  G01N1/28 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明提供一种青鳉鱼受精卵或幼鱼的DNA鉴定性别的方法，属于鱼类胚胎和早期发育研究领域。该方法包括单个鱼卵或幼鱼的RNA和DNA同步提取技术；用Trizol试剂提取RNA后，剩余有机相中加入DNA提取缓冲液，混匀，50℃-75℃温浴后，低温离心10-15分钟，呈现上下两层，取上层水相加入核酸共沉剂，加入无水乙醇，离心，去除上清，酒精清洗，NaOH溶液溶解，调pH至8.0-8.4，得到单个鱼卵或幼鱼的DNA溶液；将提取的溶液作为模板DNA，加入性别特异PCR引物，进行PCR反应，PCR反应完成后，琼脂糖凝胶电泳检测，如出现目的条带为XY型雄鱼，未出现该条带为XX型雌鱼。本发明鉴定准确性高、效果显著。