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公开(公告)号:CN119161969A
公开(公告)日:2024-12-20
申请号:CN202411085861.4
申请日:2024-08-08
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12M1/34 , C12M1/00 , C12Q1/6869 , B01L3/00
Abstract: 本发明公开了一种用于组织细胞核空间转录组测序的微流控芯片,属于微流控芯片中的微粒控制技术领域;包括游离转录组捕获层、微井层、编码A流道层、编码B流道层、核转录组捕获层。微井层上放置待测组织切片,并通过微井捕获组织切片解离后的单细胞。微井层下与游离转录组捕获层贴合,微井底部暴露的游离转录组捕获层固定有mRNA捕获序列捕获。编码A流道层与编码B流道层用于在核转录组捕获层表面固定交叉型DNA微阵列。本发明同时将编码A流道层与编码B流道层用于在游离转录组捕获层进行交叉型DNA微阵列的固定,从而实现单细胞空间游离转录组和空间核转录组的共同测序,填补了单细胞核空间转录组测序以及空间游离转录组和空间核转录组共同测序空白。
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公开(公告)号:CN118956577A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411085859.7
申请日:2024-08-08
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12M1/34 , C12M1/00 , C12Q1/6869 , B01L3/00
Abstract: 本发明公开了无需编码微珠配对的高通量单细胞转录组测序微流控芯片,包括抽真空盖部、微通道部和微井部。通过在大规模微井阵列中微井的底部共价连接核苷酸序列,得到特异性分子条形码阵列用以捕获mRNA。并通过向微通道中通入细胞悬液,使得细胞在重力作用下沉积入微井中,实现单细胞的分离。加冻融裂解液使得被微井捕获的细胞裂解后,细胞释放的mRNA被微井底部的核苷酸序列捕获,实现mRNA的固相捕获与标记。本设计使用的固相捕获方式革新了传统的编码微珠与细胞配对隔离以溯源单细胞转录组的方法。这一创新性方法的使用彻底突破了细胞和微珠在捕获以及配对时的随机性,彻底摆脱了泊松分布的限制,极大减少了试剂的浪费,提升了mRNA捕获的效率。
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