公开(公告)号：CN114317478B

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202210010284.7

申请日：2022-01-05

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 梁浩 ,  徐海畅 ,  齐昊乐 ,  伍凌奇

IPC: C12N9/10 ,  C12P19/44 ,  C12P19/18 ,  C12N15/70 ,  C12N11/04 ,  C12N11/02 ,  C12N11/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种蔗糖磷酸化酶的应用及利用其制备2‑α‑甘油葡萄糖苷的方法。所述蔗糖磷酸化酶为游离酶或固定化酶；固定化酶的制备方法为：通过基因工程手段将序列1导入大肠杆菌表达得到游离酶，用CS‑TPP@NF载体固定游离酶，得到固定化酶。以蔗糖、甘油为底物，在水或水溶液中进行催化反应，得到2‑α‑甘油葡萄糖苷。本发明中筛选出的蔗糖磷酸化酶催化活性高，在24 h内能够将蔗糖快速转化，转化率达到95%，2‑α‑甘油葡萄糖苷产量可达288.28 g/L。同时本发明的固定化酶副产物耐受性比游离酶高30%、可回收再利用，在水溶液中反应，降低生产成本，工艺简单，适合大规模工业化生产。

公开(公告)号：CN112226481B

公开(公告)日：2023-01-31

申请号：CN202011171360.X

申请日：2020-10-28

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 梁浩 ,  魏斌 ,  高惠玲 ,  徐海畅 ,  刘晓洁

IPC: C12P33/06 ,  C12P33/00 ,  C12N11/14 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明提供了一种利用新型葡萄糖醛酸酶生物催化制备甘草次酸的方法，步骤为：通过基因工程手段筛选表达新型重组葡萄糖醛酸酶；以甘草酸为底物进行催化反应，得到纯度较高的甘草次酸；在磷酸盐缓冲溶液环境下，将β‑葡萄糖醛酸酶、Fe3O4@Zr‑2MIm孵育得到固定化酶；用固定化酶和甘草酸进行催化反应，得到甘草次酸。本发明中筛选出的β‑葡萄糖醛酸酶催化活性高，在2h内就能够将甘草酸快速完全的转化，且不会产生中间产物单葡萄糖醛酸甘草次酸，方便得到高纯度的甘草次酸。同时本发明的固定化酶可以回收再利用，降低了生产成本，工艺简单，经济节约，非常适合于大规模工业化生产。本发明的固定化酶对甘草酸的转化率达到95%以上，底物甘草酸基本完全转化成甘草次酸。

公开(公告)号：CN120060183A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510220920.2

申请日：2025-02-27

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 梁浩 ,  徐海畅

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12P19/44 ,  C12P19/18

Abstract: 本发明提供了一种突变型蔗糖磷酸化酶及其在催化合成2‑O‑α‑甘油葡萄糖苷中的应用，属于酶催化剂制备技术领域，所述突变型蔗糖磷酸化酶是由野生型蔗糖磷酸化酶点突变获得，所述野生型蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述突变型蔗糖磷酸化酶的突变位点选自以下位点中的一个或两个：V23L、D30S、V26L、A55I、V70I、V93I、N191D、T264L、Q317E、R404L、E455K、R413L。本发明提供多种不同的最适反应温度、催化活性高、热稳定性强的突变型蔗糖磷酸化酶，在不同的反应温度、高底物浓度、高粘度条件下，实现2‑O‑α‑甘油葡萄糖苷的高产量、大规模工业化生产。

公开(公告)号：CN112226481A

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN202011171360.X

申请日：2020-10-28

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 梁浩 ,  魏斌 ,  高惠玲 ,  徐海畅 ,  刘晓洁

IPC: C12P33/06 ,  C12P33/00 ,  C12N11/14 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明提供了一种利用新型葡萄糖醛酸酶生物催化制备甘草次酸的方法，步骤为：通过基因工程手段筛选表达新型重组葡萄糖醛酸酶；以甘草酸为底物进行催化反应，得到纯度较高的甘草次酸；在磷酸盐缓冲溶液环境下，将β‑葡萄糖醛酸酶、Fe3O4@Zr‑2MIm孵育得到固定化酶；用固定化酶和甘草酸进行催化反应，得到甘草次酸。本发明中筛选出的β‑葡萄糖醛酸酶催化活性高，在2h内就能够将甘草酸快速完全的转化，且不会产生中间产物单葡萄糖醛酸甘草次酸，方便得到高纯度的甘草次酸。同时本发明的固定化酶可以回收再利用，降低了生产成本，工艺简单，经济节约，非常适合于大规模工业化生产。本发明的固定化酶对甘草酸的转化率达到95%以上，底物甘草酸基本完全转化成甘草次酸。

公开(公告)号：CN114317478A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202210010284.7

申请日：2022-01-05

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 梁浩 ,  徐海畅 ,  齐昊乐 ,  伍凌奇

IPC: C12N9/10 ,  C12P19/44 ,  C12P19/18 ,  C12N15/70 ,  C12N11/04 ,  C12N11/02 ,  C12N11/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种蔗糖磷酸化酶的应用及利用其制备2‑α‑甘油葡萄糖苷的方法。所述蔗糖磷酸化酶为游离酶或固定化酶；固定化酶的制备方法为：通过基因工程手段将序列1导入大肠杆菌表达得到游离酶，用CS‑TPP@NF载体固定游离酶，得到固定化酶。以蔗糖、甘油为底物，在水或水溶液中进行催化反应，得到2‑α‑甘油葡萄糖苷。本发明中筛选出的蔗糖磷酸化酶催化活性高，在24 h内能够将蔗糖快速转化，转化率达到95%，2‑α‑甘油葡萄糖苷产量可达288.28 g/L。同时本发明的固定化酶副产物耐受性比游离酶高30%、可回收再利用，在水溶液中反应，降低生产成本，工艺简单，适合大规模工业化生产。