一种工程细胞株FCHO/IL-24的无血清悬浮培养驯化方法

    公开(公告)号:CN113337473A

    公开(公告)日:2021-09-03

    申请号:CN202110411663.2

    申请日:2021-04-16

    Abstract: 本发明公开了一种工程细胞株FCHO/IL‑24的无血清悬浮培养驯化方法,包括以下步骤:(1)通过梯度降低血清浓度,驯化工程细胞株FCHO/IL‑24能够在0.5%血清贴壁条件下培养;(2)将步骤(1)得到的工程细胞株FCHO/IL‑24直接从0.5%血清贴壁培养驯化为0.5%血清悬浮培养;(3)将步骤(2)得到的工程细胞株FCHO/IL‑24在无血清培养基中悬浮培养。本申请通过梯度降低血清浓度,先驯化工程细胞株FCHO/IL‑24能够在0.5%血清贴壁条件上培养,再进行悬浮培养,最后使其能够在无血清培养基中悬浮培养,不仅能保持较高的细胞密度,同时还能稳定分泌表达rhIL‑24,为后续的悬浮培养条件和无血清培养基成份的优化奠定了基础。

    一种将丁酸钠用于促进工程细胞株分泌表达rhIL-24的方法

    公开(公告)号:CN111233996A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN202010064919.2

    申请日:2020-01-20

    Abstract: 本发明提供了一种将丁酸钠用于促进工程细胞株分泌表达rhIL-24的方法,属于基因表达技术领域,在对分泌表达rhIL-24的定点整合工程细胞株FCHO/IL-24进行10%血清贴壁、0.5%血清贴壁和0.5%血清悬浮培养的基础上,用不同终浓度(0、0.125、0.25、0.5、1和2mmol/L)丁酸钠处理细胞株。本发明中,NaBu可以提高CHO细胞分泌表达外源蛋白的水平,促进工程细胞分泌表达rhIL-24的水平,促使工程细胞发生G0/G1期阻滞,并可改变贴壁培养条件下细胞的代谢活力;将NaBu作为细胞株无血清培养基的添加剂,在高密度的悬浮培养中,提高了细胞株分泌表达rhIL-24的水平,不仅为FCHO/IL-24细胞的大规模培养提供实验数据,同时也可为用哺乳动物细胞表达其他基因工程蛋白提供借鉴。

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