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公开(公告)号：CN108841833A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810602877.6
申请日：2018-06-12
Applicant: 兰州理工大学
Abstract: 本发明提供了一种DPBF1重组片段及其应用。将DPBF1基因保守区Ⅱ(AD1)和碱性亮氨酸拉链区(bZIP)进行重组并构建于改造后的遗传转化载体pCAMBIA1301-GUSless上，遗传转化拟南芥哥伦比亚生态型，经筛选鉴定获得转基因拟南芥rDPBF1，并以过表达DPBF1编码区全序列的转基因拟南芥(DPBF1)为对照。转录水平分析表明重组基因在转基因拟南芥中可以进行转录表达。获得的转基因株系与野生型相比，表现出了花期提前、成熟种子的形态大小变大、种子千粒重显著增加、抗旱性明显增强的优良表型。
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公开(公告)号：CN105198975A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510376978.2
申请日：2015-07-01
Applicant: 兰州理工大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明提供了一种可激活酵母菌和植物细胞基因表达的多肽片段及其验证方法，通过在酵母菌单杂交系统中，对拟南芥AtDPBF4/EEL进行双向缺失突变分析，发现了可在酵母菌细胞中激活基因转录的两个多肽片段AD1和AD2；体外合成AD1和AD2的编码区序列，连接至拟南芥原生质体瞬间表达分析的效应载体pHQEff，重组质粒分别命名为pHQEff-AD1和pHQEff-AD2；拟南芥原生质体瞬间表达分析结果表明，AD1和AD2均可激活报告基因(GUS)的表达。本发明多肽片段AD1和AD2的发现为进一步构建抗干旱、耐盐碱转基因植物提供了基础，对基因工程作物的培育和改良具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN108841833B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201810602877.6
申请日：2018-06-12
Applicant: 兰州理工大学
Abstract: 本发明提供了一种DPBF1重组片段及其应用。将DPBF1基因保守区Ⅱ(AD1)和碱性亮氨酸拉链区(bZIP)进行重组并构建于改造后的遗传转化载体pCAMBIA1301‑GUSless上，遗传转化拟南芥哥伦比亚生态型，经筛选鉴定获得转基因拟南芥rDPBF1，并以过表达DPBF1编码区全序列的转基因拟南芥(DPBF1)为对照。转录水平分析表明重组基因在转基因拟南芥中可以进行转录表达。获得的转基因株系与野生型相比，表现出了花期提前、成熟种子的形态大小变大、种子千粒重显著增加、抗旱性明显增强的优良表型。
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公开(公告)号：CN105198975B
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201510376978.2
申请日：2015-07-01
Applicant: 兰州理工大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明提供了一种可激活酵母菌和植物细胞基因表达的多肽片段及其验证方法，通过在酵母菌单杂交系统中，对拟南芥AtDPBF4/EEL进行双向缺失突变分析，发现了可在酵母菌细胞中激活基因转录的两个多肽片段AD1和AD2；体外合成AD1和AD2的编码区序列，连接至拟南芥原生质体瞬间表达分析的效应载体pHQEff，重组质粒分别命名为pHQEff‑AD1和pHQEff‑AD2；拟南芥原生质体瞬间表达分析结果表明，AD1和AD2均可激活报告基因(GUS)的表达。本发明多肽片段AD1和AD2的发现为进一步构建抗干旱、耐盐碱转基因植物提供了基础，对基因工程作物的培育和改良具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN104195169A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410438235.9
申请日：2014-08-29
Applicant: 兰州理工大学
Abstract: 本发明提供了一种基于脂肪酸去饱和酶基因的抗寒转基因烟草的构建方法，首先，利用RT-PCR法扩增出了菠菜的硬脂酰基载体蛋白去饱和酶基因(SAD)，连接该基因至植物遗传转化载体pBI121上；经核苷酸序列分析克隆并重组正确的载体转化至农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中；含重组质粒的农杆菌以叶盘法转化烟草无菌苗外植体，筛选出卡那霉素抗性植株并移栽于花盆中，生长成熟后收集种子；种子播种于含卡那霉素的MS培养基上使其萌发生长；从卡那霉素抗性植株的叶片提取核DNA进行PCR检测、点杂交及Southern杂交鉴定；最后，以分子鉴定的阳性转基因烟草作为实验材料，在低温胁迫下，分别进行电导率测定和叶绿素含量测定，转SAD基因烟草的抗寒性有明显的改善。
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