公开(公告)号：CN112979825A

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN202110155163.7

申请日：2021-02-04

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  马岩林 ,  张艺凡 ,  石新彤 ,  杜秀芬 ,  谭大权 ,  牛红霞 ,  李菲 ,  龚洋

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C07K1/14 ,  A61K39/04 ,  A61K39/39 ,  A61P31/06

Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白LT29的表达纯化方法，将结核分枝杆菌活动期抗原EAST6和结核分支杆菌潜伏期抗原Rv2626c进行融合，中间以柔性肽段连接，构建了融合蛋白ESAT6‑linker‑Rv2626c。将该融合蛋白在大肠埃希菌B21工程菌中进行表达纯化，与佐剂DP联合构建结核亚单位疫苗。该融合蛋白在大肠杆菌中成功得到表达纯化；在小鼠体内可以诱导产生较强的针对结核杆菌特定抗原(ESAT6和Rv2626c)的特异性细胞免疫反应，并促进较长期的记忆性T细胞的产生，具有较强的免疫原性。本发明成功构建、表达和纯化了不带标签的新型融合蛋白LT29，该蛋白融合了结核菌活动期抗原和潜伏期抗原，可诱导产生抗原特异性细胞免疫和体液免疫，有望成为结核病预防和治疗的有效候选疫苗。