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公开(公告)号：CN116287290B
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310057100.7
申请日：2023-01-18
Applicant: 仲恺农业工程学院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明根据罗非鱼特有的基因KPL4，设计了荧光定量PCR引物，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示，并对其特异性进行了验证。用上述引物待测鱼粉样品的DNA进行荧光定量PCR扩增，根据扩增曲线计算待测样品中罗非鱼源性成分的DNA含量，判断鱼粉中是否含有罗非鱼源性成分及其实际含量范围。本发明的鉴定方法简便快捷，灵敏度高，对罗非鱼源性成分的检出限可以低至0.01％，为国内外首次提出的鱼粉中罗非鱼源性成分检测灵敏度的技术指标。该方法也适用于其它动物性原料中罗非鱼源性成分的检测。
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公开(公告)号：CN108841944A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810855127.X
申请日：2018-07-31
Applicant: 仲恺农业工程学院
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供了一种确定鱼粉中原料鱼组成的分子鉴定方法，包括(1)从所述鱼粉样品中提取DNA；(2)使用鱼类线粒体通用引物对所述DNA进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；(3)将所述PCR扩增产物连接进克隆载体中，并以所述克隆载体转化大肠杆菌感受态细胞；(4)对转化后的大肠杆菌细胞进行培养，选取阳性大肠杆菌克隆，并对其中含有的所述PCR扩增产物进行测序；以及(5)将测序结果进行BlastN比对分析，从而确定所述鱼粉样品的原料鱼组成。本发明方法适用性广，能鉴定可提取出DNA的鱼粉样品的原料鱼组成，可实现鱼粉原料鱼组成的灵敏、快速鉴定。
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公开(公告)号：CN116463429B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202310414878.9
申请日：2023-04-18
Applicant: 仲恺农业工程学院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种PCR检测鱼粉中南美白对虾源性成分的方法，涉及生物技术领域。该方法包括利用如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物，进行PCR检测的步骤。本发明首先设计了南美白对虾荧光定量PCR引物对，并验证了其特异性。随后用该引物对对样品中不同浓度梯度的南美白对虾DNA进行荧光定量PCR扩增，获得标准曲线，建立南美白对虾DNA浓度和Ct值之间的回归方程。在此基础上，通过检测待测鱼粉样品的Ct值，判断待测鱼粉中是否含有南美白对虾源性成分，并明确其含量(质量浓度)范围，最低检出限可以达到0.01％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116287290A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310057100.7
申请日：2023-01-18
Applicant: 仲恺农业工程学院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明根据罗非鱼特有的基因KPL4，设计了荧光定量PCR引物，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示，并对其特异性进行了验证。用上述引物待测鱼粉样品的DNA进行荧光定量PCR扩增，根据扩增曲线计算待测样品中罗非鱼源性成分的DNA含量，判断鱼粉中是否含有罗非鱼源性成分及其实际含量范围。本发明的鉴定方法简便快捷，灵敏度高，对罗非鱼源性成分的检出限可以低至0.01％，为国内外首次提出的鱼粉中罗非鱼源性成分检测灵敏度的技术指标。该方法也适用于其它动物性原料中罗非鱼源性成分的检测。
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公开(公告)号：CN117265130B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202311223910.1
申请日：2023-09-21
Applicant: 仲恺农业工程学院 , 广州市诚一水产养殖有限公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鱼粉中巴沙鱼源性成分定性和定量鉴定的方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明根据巴沙鱼特异性荧光引物和探针结合标准曲线快速定量检测出待测鱼粉中巴沙鱼源性成分的含量，所述巴沙鱼特异性荧光引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示。本发明的鉴定方法填补了饲料原料检测技术领域对该物种定性和定量检测方法的空白，准确率和灵敏度高，重复性好，最低检测限可达到0.01％，即微量掺假的水平。该方法克服了传统检测效果依赖个人经验、检测结果具有随机性、微量掺假难以识别的问题。该方法还适用于其它动物性饲料原料中巴沙鱼源性成分的定量检测。
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公开(公告)号：CN116463429A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310414878.9
申请日：2023-04-18
Applicant: 仲恺农业工程学院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种PCR检测鱼粉中南美白对虾源性成分的方法，涉及生物技术领域。该方法包括利用如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物，进行PCR检测的步骤。本发明首先设计了南美白对虾荧光定量PCR引物对，并验证了其特异性。随后用该引物对对样品中不同浓度梯度的南美白对虾DNA进行荧光定量PCR扩增，获得标准曲线，建立南美白对虾DNA浓度和Ct值之间的回归方程。在此基础上，通过检测待测鱼粉样品的Ct值，判断待测鱼粉中是否含有南美白对虾源性成分，并明确其含量(质量浓度)范围，最低检出限可以达到0.01％。
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公开(公告)号：CN117265131A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202311223933.2
申请日：2023-09-21
Applicant: 仲恺农业工程学院 , 广州市诚一水产养殖有限公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鱼粉中克氏原螯虾源性成分定性和定量鉴定的方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明根据克氏原螯虾特异性荧光引物结合标准曲线快速定量检测出待测鱼粉中克氏原螯虾源性成分的含量，所述克氏原螯虾特异性荧光引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示。本发明的鉴定方法填补了饲料原料检测技术领域对该物种定性和定量检测方法的空白，准确率和灵敏度高，重复性好，最低检测限可达到0.01％，即微量掺假的水平。该方法克服了传统检测效果依赖个人经验、检测结果具有随机性、微量掺假难以识别的问题。该方法还适用于其它动物性饲料原料中克氏原螯虾源性成分的定量检测。
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公开(公告)号：CN117265130A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202311223910.1
申请日：2023-09-21
Applicant: 仲恺农业工程学院 , 广州市诚一水产养殖有限公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鱼粉中巴沙鱼源性成分定性和定量鉴定的方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明根据巴沙鱼特异性荧光引物和探针结合标准曲线快速定量检测出待测鱼粉中巴沙鱼源性成分的含量，所述巴沙鱼特异性荧光引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示。本发明的鉴定方法填补了饲料原料检测技术领域对该物种定性和定量检测方法的空白，准确率和灵敏度高，重复性好，最低检测限可达到0.01％，即微量掺假的水平。该方法克服了传统检测效果依赖个人经验、检测结果具有随机性、微量掺假难以识别的问题。该方法还适用于其它动物性饲料原料中巴沙鱼源性成分的定量检测。
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