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公开(公告)号：CN114480281A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202111611847.X
申请日：2021-12-27
Applicant: 云南中医药大学
Abstract: 本发明公开了一种具有镇痛作用的乌头属植物二萜生物碱的高效细胞筛选方法，选取小胶质细胞作为筛选细胞，用含10%FBS的DMEM高糖培养基进行培养；将细胞消化制成细胞悬液，调整密度后接种、培养；弃去上清液，加入含有乌头属二萜生物碱的培养基，培养2~8h；收集细胞上清液及细胞检测强啡肽基因和蛋白的表达，选出具有镇痛潜力的乌头属二萜生物碱在动物疼痛模型上验证其镇痛作用。本发明以HAPI小胶质细胞为模型，通过乌头属二萜生物碱刺激细胞强啡肽表达水平的变化评估生物碱的镇痛作用。实验表明，细胞模型中强啡肽表达与动物行为表现一致。本发明方法可靠性强，操作简便，可高效筛选出具有镇痛作用的乌头属二萜生物碱，对开展镇痛药物研究与开发具有重要意义。
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