一种胚胎干细胞向肝脏组织结构诱导分化的方法

    公开(公告)号:CN105543175B

    公开(公告)日:2020-07-03

    申请号:CN201610013206.7

    申请日:2016-01-06

    Inventor: 胡安斌

    Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种胚胎干细胞向肝脏组织结构诱导分化的方法。本发明将E‑cadherin基因作为外源基因转染胚胎干细胞,得到高效表达E‑cadherin基因的胚胎干细胞,然后培养分化,得到拟胚体,将其移植至含有EMT抑制剂的三维细胞培养系统中进行诱导培养,得到三维生长的肝脏组织结构。本发明首次从细胞黏附和EMT水平的角度研究ESC体外向肝脏组织结构分化,E‑cadherin转染后表达水平稳定控制,可保持细胞分化中足够的细胞黏附力,使其不易分散为单层细胞;降低胚胎干细胞体外分化过快的EMT水平,调控分化肝实质细胞以及肝间质细胞同步分化以形成肝脏组织,更加符合体内组织发育机理。

    NR_073415.2在检测器官移植患者巨细胞病毒感染中的应用及试剂盒

    公开(公告)号:CN105567804A

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201510888722.X

    申请日:2015-12-07

    CPC classification number: C12Q1/6883

    Abstract: 本发明属于疾病早期诊断技术领域,具体公开了NR_073415.2在检测器官移植患者巨细胞病毒感染中的应用及试剂盒。本发明首次发现NR_073415.2可用于检测器官移植患者是否感染巨细胞病毒,具体为检测待测患者外周血单核细胞中的内参基因GAPDH和NR_073415.2的Cq值,GAPDH和NR_073415.2的Cq值至少测定3次,取平均值后按照下列公式和方法判断结果:△CT值=AVERAGE(NR_073415.2 Cq值)-AVERAGE(GAPDH Cq值);△CT值大于或等于11时,考虑患者存在巨细胞病毒感染,结果为阳性;△CT值小于11时,考虑患者不存在巨细胞病毒感染,结果为阴性。本发明在感染早期(感染第1~3天)即可检测到NR_073415.2的表达变化,而且不受免疫抑制状态的影响,对于早期诊断、早期治疗,具有重要意义。

    一种非治疗目的的恢复浸润性T淋巴细胞免疫功能的方法

    公开(公告)号:CN109294987A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811307212.9

    申请日:2018-11-05

    Abstract: 本发明提供了一种非治疗目的的恢复浸润性T淋巴细胞免疫功能的方法,属于T淋巴细胞受体技术领域,包括:将免疫功能受损的浸润性T淋巴细胞溶液与阻断剂混合,得到含有阻断剂的溶液;所述阻断剂包括anti-Tim-3阻断抗体和/或anti-PD-1阻断抗体;含有阻断剂的溶液与anti-CD3抗体、anti-CD28抗体混合后进行培养,得到培养物;将培养物与布雷非德菌素A混合、孵育,得到免疫功能恢复的浸润性T淋巴细胞。采用本发明提供的方法能够将免疫功能受损的浸润性T淋巴细胞的免疫功能恢复。

    NR_073415.2在检测器官移植患者巨细胞病毒感染中的应用及试剂盒

    公开(公告)号:CN105567804B

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201510888722.X

    申请日:2015-12-07

    Abstract: 本发明属于疾病早期诊断技术领域,具体公开了NR_073415.2在检测器官移植患者巨细胞病毒感染中的应用及试剂盒。本发明首次发现NR_073415.2可用于检测器官移植患者是否感染巨细胞病毒,具体为检测待测患者外周血单核细胞中的内参基因GAPDH和NR_073415.2的Cq值,GAPDH和NR_073415.2的Cq值至少测定3次,取平均值后按照下列公式和方法判断结果:△CT值=AVERAGE(NR_073415.2 Cq值)-AVERAGE(GAPDH Cq值);△CT值大于或等于11时,考虑患者存在巨细胞病毒感染,结果为阳性;△CT值小于11时,考虑患者不存在巨细胞病毒感染,结果为阴性。本发明在感染早期(感染第1~3天)即可检测到NR_073415.2的表达变化,而且不受免疫抑制状态的影响,对于早期诊断、早期治疗,具有重要意义。

    一种胚胎干细胞分化的肝细胞的分选方法

    公开(公告)号:CN105441382A

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201610013182.5

    申请日:2016-01-06

    Inventor: 胡安斌

    Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种胚胎干细胞分化的肝细胞的分选方法。本发明将胚胎干细胞摇动培养或悬浮培养为拟胚体,然后将拟胚体贴壁培养,逐渐生长分化为圆形的分化细胞群落,根据分化肝细胞在圆形细胞群落中的空间分布规律,在特定时期选择特定区域的细胞进行分选并重新贴壁培养。在上述贴壁培养过程中,根据细胞分化情况,选择EGF、TGF、HGF、OSM等作为拟胚体向肝细胞分化过程中的肝性生长因子,以促进肝细胞分化,整个分选过程操作简单、成本低、可明显减轻细胞损伤、干细胞分化率相较于现有技术得到大幅度提高,分选后的细胞生长状态良好,可满足肝细胞移植的细胞纯度和细胞功能要求。

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