一种基于数字PCR用于多重靶标核酸检测的方法

    公开(公告)号:CN119432984A

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202411642624.3

    申请日:2024-11-18

    Abstract: 本发明基于六通道数字PCR并采用非茎环式的通用报告探针和检测探针,在单个反应孔内加入多靶标核酸的引物、检测探针、通用报告探针等试剂进行扩增以及特殊的分析方法。该方法在单孔内仅通过使用具有固定序列的六种不同荧光基团标记的通用报告探针就可将检测靶标数量提高至15种,消除了TaqMan探针法在进行多重靶标核酸检测时不同荧光信号之间的荧光串扰现象,大幅度减少了TaqMan探针法中每一种待检测靶标核酸识别探针上修饰的荧光基团的种类和数量,降低了检测成本。

    一种基于数字PCR检测核酸完整性的方法

    公开(公告)号:CN118166077B

    公开(公告)日:2025-02-11

    申请号:CN202410259603.7

    申请日:2024-03-07

    Abstract: 本发明基于六通道数字PCR检测核酸完整性的方法,采用的试剂盒包括多个含有1‑3个简并碱基的引物和探针,可以对靶标核酸多个相似片段进行识别和扩增。同时,大部分探针的5’端标记了区别于其它探针5’端所标记的荧光染料,经过数字PCR扩增后得到了包含不同荧光染料释放出的不同颜色代表的荧光信号的微滴,之后通过对一个数字PCR反应孔中包含不同荧光信号颜色的微滴进行分析判读以区分完整型和缺陷型核酸,能够提高检测准确性。该方法克服了现有数字PCR技术中荧光标记有限、需要使用两个反应孔进行检测并且检测信息缺失的现象。

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