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    一种绵羊皮肤成纤维细胞及其制备方法
    1.
    发明公开
    一种绵羊皮肤成纤维细胞及其制备方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN114317412A

    公开(公告)日：2022-04-12

    申请号：CN202210043183.X

    申请日：2022-01-14

    Applicant: 中国计量大学

    Inventor： 管峰 ,  胡馨予 ,  徐爱春 ,  葛建 ,  刘军 ,  石国庆 ,  万鹏程

    IPC: C12N5/071

    Abstract: 本发明涉及一种绵羊皮肤成纤维细胞及其制备方法，属于细胞培养技术领域。本发明中所述的制备方法包括如下步骤：(1)用胰蛋白酶对离体绵羊皮肤组织消化30～40min后，再用Ⅰ型胶原酶消化3～4h后，离心，取沉淀，得到消化细胞；(2)将所述消化细胞接种至DMEM高糖培养基中培养至细胞汇合度为70～80％时，用胰蛋白酶消化1～2min后，离心，得第一次纯化的细胞；(3)将所述第一次纯化的细胞接种至DMEM高糖培养基中，培养至细胞汇合度为85～95％时，传代纯化1～3次得到纯度为100％的绵羊皮肤成纤维细胞。按照本发明的制备方法制备得到的绵羊成纤维细胞的纯度高，能达100％，可以稳定传代。

    一种用于细毛羊辅助选育的分子标记及应用方法
    2.
    发明公开
    一种用于细毛羊辅助选育的分子标记及应用方法 无效

    公开(公告)号：CN111394479A

    公开(公告)日：2020-07-10

    申请号：CN202010348311.2

    申请日：2020-04-28

    Applicant: 中国计量大学

    Inventor： 管峰 ,  胡馨予 ,  王楠 ,  金雨婷 ,  石国庆 ,  万鹏程 ,  代蓉 ,  徐爱春 ,  葛建 ,  刘军

    IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

    Abstract: 本发明公开了一种用于细毛羊辅助选育的分子标记及应用方法，所述分子标记为STR标记，核心序列为(CA)n重复，重复数n在5～24之间。用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示引物，对绵羊个体进行基因组DNA的PCR扩增，PCR产物测序，即可获得(CA)n重复数。当测序结果中(CA)n重复数n为17或者18时，绵羊为细毛羊品种，当n为23或者24时为非细毛羊品种；当CA重复为不连续重复时，即CA重复被两个碱基TA或GA分成两段，数量为12+11或者13+11时，为细毛羊与非细毛羊杂交品种。本发明的技术优势在于可以实现对细毛羊品种的鉴定和个体的早期辅助选择，亦可用于细毛羊杂交品种培育的辅助分子标记，可以从大量群体或细毛羊杂交后代中高效精准选择细毛羊个体，提高育种效率。

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