公开(公告)号：CN103436549B

公开(公告)日：2015-12-23

申请号：CN201310115293.3

申请日：2013-04-03

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 张春 ,  王影影 ,  齐兴梅 ,  刘涛 ,  祁静

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N9/64 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用。作为本发明技术方案的典型实施方案之一，其可以包括：利用蛋白质体外剪切系统，在特定位点断开鲎C因子中能与内毒素结合的功能片段，分别连接到断裂蛋白质内含子的N端片段(IN)和C端片段(IC)在大肠杆菌中表达，表达产物经纯化，复性以及内毒素去除后，体外诱导该蛋白质内含子发生剪切，得到C因子中CES12片段，即，具有内毒素结合活性的重组Sushi多肽。本发明能够实现鲎C因子中具有内毒素结合活性的功能片段的快速、大量以及低成本表达，并可有效避免宿主细胞中所含LPS的影响，有利于低成本内毒素检测试剂的规模化生产和应用。

公开(公告)号：CN103436549A

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201310115293.3

申请日：2013-04-03

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 张春 ,  王影影 ,  齐兴梅 ,  刘涛 ,  祁静

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N9/64 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用。作为本发明技术方案的典型实施方案之一，其可以包括：利用蛋白质体外剪切系统，在特定位点断开鲎C因子中能与内毒素结合的功能片段，分别连接到断裂蛋白质内含子的N端片段(IN)和C端片段(IC)在大肠杆菌中表达，表达产物经纯化，复性以及内毒素去除后，体外诱导该蛋白质内含子发生剪切，得到C因子中CES12片段，即，具有内毒素结合活性的重组Sushi多肽。本发明能够实现鲎C因子中具有内毒素结合活性的功能片段的快速、大量以及低成本表达，并可有效避免宿主细胞中所含LPS的影响，有利于低成本内毒素检测试剂的规模化生产和应用。