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公开(公告)号：CN106119273A
公开(公告)日：2016-11-16
申请号：CN201610460793.4
申请日：2016-06-22
Applicant: 中国科学院生态环境研究中心
CPC classification number: C12N15/78 , C07K14/43595 , C12N15/113 , C12N2800/101 , C12N2830/00 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种不产酰基高丝氨酸内酯(AHL)菌株的可视化检测的方法及其应用。本发明的方法是将组成型表达绿色荧光蛋白的载体导入不产AHL的菌株中实现的，组成型表达绿色荧光蛋白的载体是将组成型表达绿色荧光蛋白GFP的启动子插入至绿色荧光蛋白基因gfp上游得到的载体。通过实验证明：将组成型表达绿色荧光蛋白GFP载体电击转化于不产AHL的植物病原菌中，借助荧光显微镜可清晰地观察其在植物宿主上的生态分布，从而对植物病原菌进行荧光标记并用于其在植物上的生态分布研究。
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公开(公告)号：CN106191195A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610542925.8
申请日：2016-07-11
Applicant: 中国科学院生态环境研究中心
Abstract: 本发明公开了一种测定总酰基高丝氨酸内酯(AHL)含量的方法及其应用。该方法根据AHL生物报告菌株根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens A136遇到AHL时呈现蓝色现象且其显色距离与AHL浓度呈正相关这一特点而建立，适用于检测待测样品是否含有AHL及其浓度测定。利用的本发明AHL报告菌株根癌农杆菌A.tumefaciens A136，可检测广谱的AHLs，对酰基侧链长度为C6到C14的AHL具有不同程度的敏感性，且基于该菌株的检测方法具有简单、快速、直观和精确等优点，可以广泛应用于AHL检测及其浓度的测定。
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公开(公告)号：CN106191195B
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201610542925.8
申请日：2016-07-11
Applicant: 中国科学院生态环境研究中心
Abstract: 本发明公开了一种测定总酰基高丝氨酸内酯(AHL)含量的方法及其应用。该方法根据AHL生物报告菌株根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens A136遇到AHL时呈现蓝色现象且其显色距离与AHL浓度呈正相关这一特点而建立，适用于检测待测样品是否含有AHL及其浓度测定。利用的本发明AHL报告菌株根癌农杆菌A.tumefaciens A136，可检测广谱的AHLs，对酰基侧链长度为C6到C14的AHL具有不同程度的敏感性，且基于该菌株的检测方法具有简单、快速、直观和精确等优点，可以广泛应用于AHL检测及其浓度的测定。
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公开(公告)号：CN106086057A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610459685.5
申请日：2016-06-22
Applicant: 中国科学院生态环境研究中心
CPC classification number: C12N15/78 , C07K14/00 , G01N21/6402
Abstract: 本发明公开了一种产酰基高丝氨酸内酯(AHL)菌株的可视化检测的方法及其应用。本发明将含有响应AHL的诱导型启动子PahlI及下游绿色荧光蛋白报告基因gfp的pBQ9载体电击转化于产AHL的植物病原菌中，构建荧光标记的重组菌株，通过对产生群体感应的信号分子AHL的植物病原菌进行荧光标记，以可视化宿主植物上的病原菌，以提供一种产AHL菌株的可视化方法。实验表明，利用荧光显微镜可以清晰地观察到荧光标记的病原菌在植物叶片上的定殖位点，尤其是针对于活细胞的定位，具有灵敏、快速、直观的优点。
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公开(公告)号：CN106085939A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610460794.9
申请日：2016-06-22
Applicant: 中国科学院生态环境研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测酰基高丝氨酸内酯(AHL)的方法。本发明的方法是将响应AHL的pBQ9载体电击转化导入不产AHL的宿主菌株中，构建检测环境AHL的重组菌株psyI‑/pBQ9；并通过外源添加AHL诱导重组菌株表达GFP，利用其相对绿色荧光强弱来测定pBQ9载体对AHL响应的最短时间及其最低浓度。通过实验证明：本发明的重组菌株psyI‑/pBQ9可检测环境AHL的最低浓度为100nM，最短诱导或响应时间为2小时。本发明的重组菌株可用来检测环境中是否含有AHL，且检测方法具有灵敏、快速、直观的优点。
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