冬虫夏草菌菌种的分离方法及其应用

    公开(公告)号:CN112772294B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN202110005981.9

    申请日:2021-01-05

    Abstract: 本发明提供了冬虫夏草菌菌种的分离方法,包括:1)在无菌条件下培养冬虫夏草鲜草并收集弹射的冬虫夏草子囊孢子;2)将步骤1)收集的冬虫夏草子囊孢子在无菌条件下用无菌水洗涤后稀释得到子囊孢子稀释液;3)将适量步骤2)所述子囊孢子稀释液在水琼脂平板上涂布展开、培养并萌发形成菌丝团;4)挑取单个子囊孢子萌发形成的菌丝团转移至液体培养基继续培养,所述菌丝团在所述液体培养基中产生一定数量芽生孢子后,接种至新的液体培养基或者固体培养基扩大培养,得到冬虫夏草菌。本发明还提供了冬虫夏草的人工培植方法和液体培养基在分离培养冬虫夏草菌中的用途。本发明的冬虫夏草菌菌种分离的方法具有分离周期短、效率高等显著优点。

    冬虫夏草菌菌种的分离方法及其应用

    公开(公告)号:CN112772294A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110005981.9

    申请日:2021-01-05

    Abstract: 本发明提供了冬虫夏草菌菌种的分离方法,包括:1)在无菌条件下培养冬虫夏草鲜草并收集弹射的冬虫夏草子囊孢子;2)将步骤1)收集的冬虫夏草子囊孢子在无菌条件下用无菌水洗涤后稀释得到子囊孢子稀释液;3)将适量步骤2)所述子囊孢子稀释液在水琼脂平板上涂布展开、培养并萌发形成菌丝团;4)挑取单个子囊孢子萌发形成的菌丝团转移至液体培养基继续培养,所述菌丝团在所述液体培养基中产生一定数量芽生孢子后,接种至新的液体培养基或者固体培养基扩大培养,得到冬虫夏草菌。本发明还提供了冬虫夏草的人工培植方法和液体培养基在分离培养冬虫夏草菌中的用途。本发明的冬虫夏草菌菌种分离的方法具有分离周期短、效率高等显著优点。

    一种建立昆虫细胞系的方法

    公开(公告)号:CN108588003B

    公开(公告)日:2020-06-26

    申请号:CN201810390678.3

    申请日:2018-04-27

    Abstract: 本发明提供了一种建立昆虫细胞系的方法,所述方法包括以下步骤:1)在昆虫细胞培养液中培养昆虫组织,以获得分散的原代昆虫细胞;2)物理性低氧诱导或化学性低氧诱导步骤1)所获得的原代细胞;3)半量更换昆虫细胞培养液后,对步骤2)的原代细胞进行复氧,直至观察到细胞不断增殖布满整个瓶底;所述复氧条件为:在25‑28℃、复氧诱导10‑30天;4)传代培养步骤3)获得的细胞,获得能够连续传代的细胞,从而建立昆虫细胞系;整个过程都是在无菌条件下进行。与现有技术相比,本发明的方法显著提升了昆虫原代细胞建系成功率以及缩短了昆虫建系前所需的培养时间。

    一种建立昆虫细胞系的方法

    公开(公告)号:CN108588003A

    公开(公告)日:2018-09-28

    申请号:CN201810390678.3

    申请日:2018-04-27

    Abstract: 本发明提供了一种建立昆虫细胞系的方法,所述方法包括以下步骤:1)在昆虫细胞培养液中培养昆虫组织,以获得分散的原代昆虫细胞;2)物理性低氧诱导或化学性低氧诱导步骤1)所获得的原代细胞;3)半量更换昆虫细胞培养液后,对步骤2)的原代细胞进行复氧,直至观察到细胞不断增殖布满整个瓶底;所述复氧条件为:在25-28℃、复氧诱导10-30天;4)传代培养步骤3)获得的细胞,获得能够连续传代的细胞,从而建立昆虫细胞系;整个过程都是在无菌条件下进行。与现有技术相比,本发明的方法显著提升了昆虫原代细胞建系成功率以及缩短了昆虫建系前所需的培养时间。

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