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公开(公告)号：CN119220486A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411523306.5
申请日：2024-10-30
Applicant: 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
Abstract: 本发明提供了一种鲤卵原干细胞的体外培养、传代和纯化方法，属于细胞体外培养技术领域。本发明提供了一种鲤卵原干细胞的体外培养方法，包括选取雌鱼分离卵巢组织，从卵巢组织中分离原代卵原干细胞后进行贴壁培养，并对贴壁培养后的卵原干细胞进行传代培养和纯化。本发明还提供了对传代并纯化得到的鲤卵原干细胞进行冷冻保存和复苏。本发明利用组织贴壁法培养鲤卵原干细胞，第3天即可观察到有长条状、三角形状、不规则多边形细胞从组织小块中爬出，向四周延伸；经细胞传代后，鲤卵原干细胞生长状态良好。本发明经体外培养、传代并纯化以及冷冻保存并复苏后的鲤卵原干细胞具有典型的生殖干细胞特征和多能性。
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公开(公告)号：CN113151361A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110478410.7
申请日：2021-04-30
Applicant: 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
IPC: C12N15/89 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 一种无肌间刺鲫品系培育方法，它涉及一种水产养殖品种培育方法。为对鲫肌间刺进行遗传改良，本发明提出了一种通过基因敲除bmp6基因培育少或无肌间刺鲫的方法。培育方法：针对bmp6基因在鲫基因组中的2个拷贝bmp6a和bmp6b分别设计敲除靶位点，然后通过2轮基因敲除和筛选，获得F2代bmp6a和bmp6b双基因突变纯合系，然后利用F2代bmp6a和bmp6b双基因突变纯合系进行扩繁形成无肌间刺鲫新品系。本发明方法获得肌间刺数量在20枚以下和无肌间刺的鲫品种。
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公开(公告)号：CN113088485A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110520788.9
申请日：2021-05-13
Applicant: 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 斑马鱼成骨细胞体外培养方法，属于细胞培养技术领域，涉及一种斑马鱼脊椎骨组织成骨细胞的培养方法。体外培养方法：一、斑马鱼成鱼消毒、麻醉；二、获取斑马鱼脊椎；三、组织块培养；四、细胞融合80％以上再用胰酶进行细胞消化，计数并传代，完成斑马鱼成骨细胞系的制备。本发明方法简单易行且成本较低，减少了鱼使用数量、避免使用胶原酶；有效避免了原代组织用酶消化培养方法作用时间长、对细胞损伤大、影响细胞贴壁及成活的能力的问题。
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公开(公告)号：CN119040253A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411253802.3
申请日：2024-09-06
Applicant: 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
IPC: C12N5/076
Abstract: 本发明提供了一种鲤精原生殖干细胞体外培养基、培养方法及应用，属于生殖干细胞体外培养技术领域。本发明鲤精原生殖干细胞体外培养基，包括以下成分：10％‑20％胎牛血清，2‑20ng/mL碱性成纤维细胞生长因子，2‑20ng/mL白血病抑制因子，0.5％‑2％鲤血清，0.5％‑2％斑马鱼胚胎提取物；培养方法包括选取雄鱼分离性腺组织，原代精原生殖干细胞贴壁培养、传代培养、纯化及冷冻保存和复苏。本发明提供了一种简便、高效的鲤精原生殖干细胞系体外培养的技术体系，采用本发明培养基及培养方法培养得到的鲤精原生殖干细胞系纯度高，且具有良好的多功能性。
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公开(公告)号：CN113088485B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202110520788.9
申请日：2021-05-13
Applicant: 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 斑马鱼成骨细胞体外培养方法，属于细胞培养技术领域，涉及一种斑马鱼脊椎骨组织成骨细胞的培养方法。体外培养方法：一、斑马鱼成鱼消毒、麻醉；二、获取斑马鱼脊椎；三、组织块培养；四、细胞融合80％以上再用胰酶进行细胞消化，计数并传代，完成斑马鱼成骨细胞系的制备。本发明方法简单易行且成本较低，减少了鱼使用数量、避免使用胶原酶；有效避免了原代组织用酶消化培养方法作用时间长、对细胞损伤大、影响细胞贴壁及成活的能力的问题。
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