公开(公告)号：CN106755380A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611145759.4

申请日：2016-12-13

Applicant: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

Inventor： 肖炜 ,  杨弘 ,  耿青 ,  李大宇 ,  祝璟琳 ,  邹芝英

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/10 ,  C40B50/06

CPC classification number: C12Q1/6806 ,  C12N15/1093 ,  C40B50/06 ,  C12Q2525/191 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2523/319

Abstract: 本发明涉及一种尼罗罗非鱼性染色体DNA文库的构建方法，属于分子生物学技术领域。其包括尼罗罗非鱼头肾细胞培养、细胞低渗处理、细胞固定、制片、染色体切割、分离、酶切及接头连接、扩增及回收及片段测序和分析过程。本发明所述方法具有标准化、操作简便的优点；本发明所述方法采用头肾细胞制作的染色体分离相中淋巴细胞比率远高于血细胞，因而保证同一视野内具有良好的染色体分离相，明显提升了制片效率；本发明所述方法中性染色体在高倍视野下与其他染色体能够显著区分；本发明所述方法切割稳定、重复性高，降低了尼罗罗非鱼性染色体的分离难度，提高文库构建的特异性。