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公开(公告)号：CN119287058A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411371170.0
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , G01N1/28 , G01N1/30 , G01N21/84 , C12N15/82 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明提供了一种评估转基因杨树苗期植株材性的方法和过表达pagEXPA1基因在促进杨树木质部发育中的应用，涉及林木材性测定技术领域。本发明评估转基因杨树苗期植株材性的方法，包括以下步骤：S1.通过PCR检测外源基因是否整合到杨树基因组中；S2.检测外源基因在杨树中的表达水平；S3.对转基因杨树的茎干维管组织进行显微结构分析；S4.通过纤维离析将纤维、导管、筛管细胞分离，将离析好的纤维染色，观察纤维、导管、筛管细胞的形态和结构。本发明的方法可以在杨树生长早期就能对木材材性进行全面评估。本发明还提供了过表达pagEXPA1基因在促进杨树木质部发育中的应用，为杨树种植资源改良打下了基础。
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公开(公告)号：CN117965615A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311559936.3
申请日：2023-11-22
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所 , 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种基于根系侵染的黑杨遗传转化方法，属于植物生物工程技术领域；包括：1)采用携带抗除草剂草铵膦筛选标记的表达载体的农杆菌，侵染44号抗虫黑杨带有1‑2cm茎节的无菌幼苗根系，根系剪切成只保留根茎连接处0.2‑0.5cm的根长的结构；2)将侵染后完成共培养的根系放置到含有草铵膦筛选的生根培养基上进行培养；3)将在草铵膦筛选生根培养基上生根的新生根剪切成小段，放置到含有0.8mg/L草铵膦浓度的分化培养基，分化出芽；4)将所述不定芽接种到含有草铵膦筛选的生根培养基上进行培养；5)对所述生根幼苗进行GUS染色鉴定。本发明通过对具有抗性的转基因植株进行再次草铵膦抗性表达载体的农杆菌介导转化，克服了已转基因植株再次转化难以获得阳性苗的约束性，同时缩短了黑杨转化周期至3个月，提高黑杨进行转化的效率至29.03％。本发明将为黑杨分子设计育种提供技术保障。
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公开(公告)号：CN116004653A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211256206.1
申请日：2022-10-13
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所 , 泰安市泰山林业科学研究院
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树木质部发育的PagERF81基因及其应用，涉及生物基因工程技术领域；PagERF81基因的编码区核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过CRISPR/Cas9敲除PagERF81基因，转基因杨树与野生型比较，木质部区域中导管细胞数量增加，导管细胞面积减少，且木质素含量显著提高，说明PagERF81能够调控杨树木质部发育，且显著抑制木质素合成。本发明为木质素合成的调控手段提供了新的选择，在林木基因工程领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN114292855B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202111405818.8
申请日：2021-11-24
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树木质部发育的PagARR9基因及其应用，涉及生物基因工程技术领域；PagARR9基因的编码区核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过将PagARR9基因转入杨树，过量表达PagARR9的转基因杨树与野生型比较，木质部显著减少，通过CRISPR/Cas9敲除PagARR9基因，转基因杨树与野生型比较，木质部显著增加；说明细胞分裂素响应调节因子基因PagARR9，是调控杨树木质部发育的关键调节因子。本发明为木质部发育的调控手段提供了新的选择，在林木基因工程领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN112358534B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202011166504.2
申请日：2020-10-27
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树纤维长度的生长素响应因子基因及其应用，涉及生物技术领域。PagARF6.1的核苷酸序列如序列表中的序列1所示；PagARF6.1的表达蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示；PagARF6.1的载体PMDC32‑PagARF6.1的核苷酸序列如序列表中的序列3所示。本发明通过将PagARF6.1基因转入杨树，过量表达PagARF6.1的转基因杨树与野生型比较纤维长度显著增加，说明杨树生长素响应因子基因PagARF6.1是调控杨树纤维长度的关键调节因子，为纤维长度的调控手段提供了新的选择，在林木基因工程领域有重要应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116183470B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202211658459.1
申请日：2022-12-22
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: G01N15/1433 , G01N15/01 , G01N1/28 , G01N1/30 , G01N1/40
Abstract: 本发明公开了一种基于细胞流式分选的木本植物细胞程序性死亡检测方法，属于细胞检测技术领域，包括如下步骤：木质部细胞原生质体制备及AnnexinV、PI染色处理；对染色的木质部细胞原生质体进行成像流式检测处理；对染色的木质部细胞原生质体进行流式分群、分选；对分选后不同凋亡亚群细胞显微成像检测其形态；提取分选后不同凋亡亚群细胞的RNA，利用RT‑qPCR检测细胞程序性死亡及材性形成相关基因的表达量。本发明检测木本植物细胞程序性死亡的方法，通过流式细胞仪分群分析出不同凋亡阶段细胞个数，得出不同阶段凋亡率；又进一步通过流式细胞仪对不同凋亡亚群细胞进行分选，通过RT‑qPCR鉴定相关基因表达水平；该方法利用流式细胞仪分选木质部细胞程序性死亡不同阶段的特定细胞，具有定量可靠，分析准确，结果精度高等优点。
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公开(公告)号：CN116183470A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211658459.1
申请日：2022-12-22
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于细胞流式分选的木本植物细胞程序性死亡检测方法，属于细胞检测技术领域，包括如下步骤：木质部细胞原生质体制备及AnnexinV、PI染色处理；对染色的木质部细胞原生质体进行成像流式检测处理；对染色的木质部细胞原生质体进行流式分群、分选；对分选后不同凋亡亚群细胞显微成像检测其形态；提取分选后不同凋亡亚群细胞的RNA，利用RT‑qPCR检测细胞程序性死亡及材性形成相关基因的表达量。本发明检测木本植物细胞程序性死亡的方法，通过流式细胞仪分群分析出不同凋亡阶段细胞个数，得出不同阶段凋亡率；又进一步通过流式细胞仪对不同凋亡亚群细胞进行分选，通过RT‑qPCR鉴定相关基因表达水平；该方法利用流式细胞仪分选木质部细胞程序性死亡不同阶段的特定细胞，具有定量可靠，分析准确，结果精度高等优点。
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公开(公告)号：CN104975029A
公开(公告)日：2015-10-14
申请号：CN201510392059.4
申请日：2015-07-06
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/84 , C07K14/415 , C12Q1/68 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树不定根发育的生长素响应因子基因PtARF3.1及其应用，属于生物基因工程技术领域。PtARF3.1的核苷酸序列如序列表中的序列1所示；PtARF3.1的表达蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示；PtARF3.1的载体PMDC32-PtARF3.1的核苷酸序列如序列表中的序列3所示。本发明通过将PtARF3.1基因转入杨树，过量表达PtARF3.1的转基因杨树与野生型比较生根明显提早，且不定根数量显著增多，说明杨树生长素响应因子基因PtARF3.1是控制杨树不定根发生发育的关键调节因子，在林木基因工程和无性系林业领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN114292855A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111405818.8
申请日：2021-11-24
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树木质部发育的PagARR9基因及其应用，涉及生物基因工程技术领域；PagARR9基因的编码区核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过将PagARR9基因转入杨树，过量表达PagARR9的转基因杨树与野生型比较，木质部显著减少，通过CRISPR/Cas9敲除PagARR9基因，转基因杨树与野生型比较，木质部显著增加；说明细胞分裂素响应调节因子基因PagARR9，是调控杨树木质部发育的关键调节因子。本发明为木质部发育的调控手段提供了新的选择，在林木基因工程领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN104975029B
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201510392059.4
申请日：2015-07-06
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/84 , C07K14/415 , C12Q1/6895 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树不定根发育的生长素响应因子基因PtARF3.1及其应用，属于生物基因工程技术领域。PtARF3.1的核苷酸序列如序列表中的序列1所示；PtARF3.1的表达蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示；PtARF3.1的载体PMDC32‑PtARF3.1的核苷酸序列如序列表中的序列3所示。本发明通过将PtARF3.1基因转入杨树，过量表达PtARF3.1的转基因杨树与野生型比较生根明显提早，且不定根数量显著增多，说明杨树生长素响应因子基因PtARF3.1是控制杨树不定根发生发育的关键调节因子，在林木基因工程和无性系林业领域有重要应用价值。
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