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公开(公告)号:CN119776572A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202411950077.5
申请日:2024-12-27
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所 , 全国农业技术推广服务中心
Inventor: 李允静 , 任雪贞 , 肖芳 , 王培 , 高鸿飞 , 景琦 , 武玉花 , 孙全 , 李俊 , 徐宇辰 , 翟杉杉 , 晋芳 , 吴刚 , 金石桥 , 周洋 , 赵娟 , 刘雅娣 , 姬志荷
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种基因编辑大豆种子真实性快速识别引物组合、试剂盒及其应用。利用本发明提供的KASP引物组合及其试剂盒能够准确快速识别GmFAD2‑1A基因和GmFAD2‑1B基因是否为编辑型,且能够准确区分编辑位点是纯合型还是杂合型,进而判断是否为基因编辑大豆AE15‑18‑1种子,检测时间缩短到45min,灵敏度达0.25ng,特异性强,检测成本低,检测效率高,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114544963B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202011328659.1
申请日:2020-11-24
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高检测样品中含有的转基因事件效率的方法,所述方法包括用第一荧光染料标记第一靶标抗体,用第二荧光染料标记第二靶标抗体;通过样品处理、石蜡包埋切片、石蜡切片脱蜡至水、抗原修复、屏蔽自发荧光处理、免疫荧光染色和镜检拍照后,根据观察到的荧光颜色判断待测样品中的转基因事件数量。
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公开(公告)号:CN117947202A
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410021622.6
申请日:2024-01-05
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/63 , C12Q1/686 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆转化体特异性检测的质粒DNA分子,包括大豆内标准基因,及待检测的转基因大豆转化体特异性边界序列片段,以及将两种基因序列片段组装成整体融合片段序列。本发明以我国自主产权的转基因大豆转化体为研究对象,获得其转化体特异性序列,按照一定顺序进行拼接组装,插入到载体骨架,研制出一种含有1种大豆内标准基因和4种转化体特异性序列的质粒DNA分子,利用建立的二重定性、定量PCR方法,以满足高效地定性定量检测的需要。本发明的重组表达质粒能够同时适用于4种转基因大豆转化体的二重定性和定量检测,能够满足当前我国自主知识产权转基因大豆产业化监管的检测需求。
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公开(公告)号:CN114958989B
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202210169741.7
申请日:2022-02-23
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所 , 南昌大学
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Q1/6806 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种用于快速直接二重PCR扩增的处理液、扩增体系及试剂盒,具体公开了用于直接PCR扩增的预处理液,所述的预处理液为含有0.25mol/LNaOH和0.5mmol/L Na2EDTA的50mmol/L,pH8.0的Tris‑HCl溶液,并分别加入BSA、Tween 20和MgCl2·6H2O。还公开了直接PCR扩增的预处理液作为将植物种子或叶片预处理为能够进行PCR直接扩增的唯一处理液的用途。本发明中预处理液能够一步法完成植物种子等组织中基因组DNA的提取,并且本发明采用多重荧光快速PCR检测,进一步提高分析准确度,缩短分析时间。
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公开(公告)号:CN110551842B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN201910832581.8
申请日:2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定转基因玉米MIR604单株(单粒)基因型的方法,涉及转基因育种和转基因标准物质生产领域中转基因玉米MIR604纯合单株、杂合单株的快速鉴定技术。根据转基因玉米MIR604外源基因插入位点两侧的玉米基因组序列,设计引物和探针。将该引物探针组合与MIR604转化体特异性引物探针组合一起使用,能快速鉴定出转基因玉米MIR604的纯合单株和杂合单株。本发明解决了转基因玉米培育和转基因标准物质研制中缺乏快速鉴定转基因玉米MIR604基因型方法的问题,应用本方法能够快速、经济的鉴定出转基因玉米MIR604纯合单株和杂合单株,降低了人力成本和经济成本。
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公开(公告)号:CN110512023B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN201910832044.3
申请日:2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定转基因大豆MON89788单株基因型的方法,涉及转基因育种和转基因标准物质生产领域中转基因大豆MON89788纯合单株(单粒)、杂合单株的快速鉴定技术。根据转基因大豆MON89788外源基因插入位点两侧的大豆基因组序列,设计引物和探针。将该引物探针组合与MON89788转化体特异性引物探针组合一起使用,能快速鉴定出转基因大豆MON89788的纯合单株和杂合单株。本发明解决了转基因大豆培育和转基因标准物质研制中缺乏快速鉴定转基因大豆MON89788基因型方法的问题,应用本方法能够快速、经济的鉴定出转基因大豆MON89788纯合单株和杂合单株,降低了人力成本和经济成本。
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公开(公告)号:CN108863553B
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN201810837742.8
申请日:2018-07-26
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: C05F17/10
Abstract: 本发明公开了一种作物秸秆腐熟剂的助剂及制备方法,它由一定比例的短梗霉多糖、纳米二氧化硅、腐植酸钾、月桂酰基谷氨酸、碳酸铵、硫酸锰、磷酸二氢钾、蒸馏水组成,步骤是:(1)分别称取各原料和蒸馏水备用;(2)将其中的短梗霉多糖、腐植酸钾、月桂酰基谷氨酸、碳酸铵、硫酸锰、磷酸二氢钾粉末混合后加入蒸馏水,混合均匀,获得混合物;(3)将混合物与纳米二氧化硅用酒精溶解后倒入,搅拌均匀,待沉淀全部溶解后,用稀硫酸调PH值,加剩下蒸馏水定容,制成助剂。配方合理,使用方便,能有效激活作物秸秆腐熟剂中的微生物活性,促进作物秸秆的纤维素、木质素等成分快速有效降解。生态环保,无环境污染,便于推广应用。
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公开(公告)号:CN106947729B
公开(公告)日:2019-10-08
申请号:CN201710164468.8
申请日:2017-03-17
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种同步分离高纯度植物叶绿体和线粒体的方法,其步骤是:A.叶片组织加入CIB缓冲液,研磨后依次通过70μm、35μm和15μm滤网过滤,过滤液200×g离心5min,去除组织残渣、细胞碎片;B.将上述滤液1000×g离心10min,收集富含叶绿体的沉淀;C.收集步骤B离心后的上清液,5μm滤网过滤,过滤液经2000×g离心10min,弃沉淀,上清液17000×g离心10min,收集富含线粒体沉淀;D.上述沉淀分别用洗涤缓冲液洗涤,并用DNase I消化以去除背景基因组的污染;E.叶绿体沉淀1000×g离心10 min后弃上清,线粒体沉淀17000×g离心10 min后弃上清,沉淀用洗涤缓冲液洗涤。
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公开(公告)号:CN106000496B
公开(公告)日:2017-10-17
申请号:CN201610397570.8
申请日:2016-06-07
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC: B01L3/02 , C03B23/047 , C12N5/04 , C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种玻璃微量吸液器的制备方法及应用,通过将1mm玻璃毛细管加热变软后,两端拉开,将断裂形成尖端打磨形成直径为25~30μm的开口,非尖端的一端与橡皮软管相连,橡皮软管的末端密封,即得玻璃微量吸液器。该玻璃微量吸液器可显微分离微量液态组织,本发明利用该吸液器分离了高纯度的甘蓝型油菜液态胚乳,同时公开了液态胚乳基因组DNA抽提方法,可为研究三倍体胚乳的发育,胚乳和胚胎间的相互作用机理提供高纯度材料和DNA。
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公开(公告)号:CN106834346A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710049122.3
申请日:2017-01-23
Applicant: 中国农业科学院油料作物研究所
CPC classification number: C12N15/8241 , C12N15/8205 , C12Q1/6806 , C12Q1/6895 , C12Q2600/166
Abstract: 本发明公开了一个聚合常用筛查靶标的转基因油菜SD‑rapeseed及其应用,涉及包括遗传转化及转基因检测在内的生物技术领域。在本发明中,通过农杆菌介导法将常用的11个转基因筛查元件导入到常规油菜品种中双6号中,获得转基因筛查油菜SD‑rapeseed。插入11个转基因筛查元件的融合序列如SEQ NO.1。以转基因油菜SD‑rapeseed作为原材料可以制备转基因油菜筛查检测通用基体标准物质及基因组DNA标准物质。本发明适用于转基因油菜筛查检测及筛查检测标准物质的制备,克服了制备质粒标准物质容易污染环境的缺陷。
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