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公开(公告)号：CN104133054B
公开(公告)日：2016-02-17
申请号：CN201410318625.2
申请日：2014-07-04
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: G01N33/48
Abstract: 本发明提供了一种评价转基因棉花对大草蛉影响的生物测定方法，包括在培养皿底部铺入琼脂；将转基因棉花叶片放入琼脂表面，接入初孵棉铃虫幼虫；大草蛉初孵幼虫先用豌豆蚜饲喂1-3天，之后用取食转基因棉花叶片1-3天的棉铃虫幼虫饲喂大草蛉幼虫；从饲喂棉铃虫幼虫第1天起每天观察大草蛉幼虫生长发育情况，直至化蛹、羽化；设置对照组；以大草蛉的化蛹率、羽化率、幼虫重量、成虫重量、总发育时间作为指标，比较处理组与对照组的差异，通过方差分析比较其差异显著性，评价转基因棉花对大草蛉的影响，该生物测定方法适用广泛，对利用“转基因植物-害虫-捕食性天敌”营养关系评价转基因植物中高剂量蛋白对捕食性天敌的影响都能够进行有效测定。
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公开(公告)号：CN103609529A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310429417.5
申请日：2013-09-18
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01K67/033 , A23K1/18 , A23K1/16
Abstract: 本发明提供一种评价生物蛋白对绿盲蝽影响的方法，包括：1）将待测生物蛋白稀释成不同浓度，与绿盲蝽人工饲料混合，制得生物蛋白测定饲料，并以不添加生物蛋白的饲料组作为对照；2）用拉伸的封口膜分别包裹测定饲料和对照饲料，制成胶囊；3）将胶囊粘在无盖饲育盒的侧壁上，4）在饲育盒中接入绿盲蝽若虫，用纱布封口，进行培养；5）从第0天开始记录绿盲蝽的死亡情况或体重变化，从而评价生物蛋白对绿盲蝽的影响。本方法适用范围广，对具有胃毒、内吸作用的药剂及溶于人工饲料的化学物质均能够有效测定，解决了包括绿盲蝽在内的刺吸式口器昆虫难于直接接触不同浓度的生物蛋白等问题，能准确测定生物蛋白对绿盲蝽的影响，具有很强的实用性。
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公开(公告)号：CN105624267B
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201610089908.3
申请日：2016-02-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/37
Abstract: 本发明提供一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法，其是将特异性消化酶抑制剂与昆虫中肠消化酶液按比例混合，在体外对Bt蛋白原毒素进行活化，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对活化效果进行分析，用软件ImageJ 1.46对结果进行统计，最后通过方差分析来评价中肠消化酶参与的Bt蛋白活化作用。本方法可操作性强，准确高效，可用于评价哪些不同的消化酶参与了不同类Bt蛋白的活化，同时还可以分析不同消化酶在活化Bt蛋白中的主次作用，对于选择合理的Bt组合杀虫剂或转叠加基因作物具有借鉴作用。此外，该方法可应用于对Bt生化水平抗性的评价工作。
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公开(公告)号：CN105624267A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610089908.3
申请日：2016-02-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/37
Abstract: 本发明提供一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法，其是将特异性消化酶抑制剂与昆虫中肠消化酶液按比例混合，在体外对Bt蛋白原毒素进行活化，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对活化效果进行分析，用软件ImageJ 1.46对结果进行统计，最后通过方差分析来评价中肠消化酶参与的Bt蛋白活化作用。本方法可操作性强，准确高效，可用于评价哪些不同的消化酶参与了不同类Bt蛋白的活化，同时还可以分析不同消化酶在活化Bt蛋白中的主次作用，对于选择合理的Bt组合杀虫剂或转叠加基因作物具有借鉴作用。此外，该方法可应用于对Bt生化水平抗性的评价工作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102981001B
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201210480447.4
申请日：2012-11-22
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种评价棉铃虫抗性治理效果的方法。该方法包括以下步骤：1）选择两种用于治理棉铃虫的药物；2）接种敏感或抗性棉铃虫幼虫；3）观察幼虫死亡情况，计算死亡率；4）建立二因素D-饱和方法建立回归方程，评价两种药物的治理效果。本发明方法可操作性强，准确高效，可在Bt蛋白或其他蛋白防治害虫和治理抗性的效果评价中广泛应用。
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公开(公告)号：CN105994170A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610375941.2
申请日：2016-05-31
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01K67/033
CPC classification number: A01K67/033
Abstract: 本发明涉及昆虫饲养，具体公开了一种提高棉铃虫人工饲养效率的装置和方法，所述装置的主体为孔板，孔板的上盖内加入与上盖尺寸相同的吹塑纸。所述方法为利用所述装置饲养棉铃虫至3龄幼虫，挑选生长一致的3龄幼虫转移到养虫管中继续饲养至化蛹。本发明针对低龄棉铃虫幼虫逃逸率高、发育进度不齐、易交叉感染等问题，提出初孵幼虫在24孔板中饲养，增加吹塑纸防止逃逸，3龄后转移到玻璃养虫管中饲养的技术。通过比较加吹塑纸与不加吹塑纸的差异，证明利用吹塑纸对降低幼虫逃逸率、提高发育整齐度具有积极效果。
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公开(公告)号：CN105779502A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610151492.3
申请日：2016-03-16
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/87 , A01K67/033
CPC classification number: C12N15/87 , A01K67/0339 , A01K2207/05 , A01K2217/058 , A01K2227/706 , C12N9/485
Abstract: 本发明提供一种提高咀嚼式口器昆虫RNA干扰效率的方法，包括：1)用无RNA酶的水将靶基因特异性siRNA配成一定浓度的溶液；2)将人工饲料加工成3～5mm厚、直径1～2cm的圆片，置于24孔板中；3)取1)的溶液加在2)的圆片上，使溶液被饲料完全吸收；4)将初孵的咀嚼式口器昆虫幼虫，放入3)的有饲料圆片的24孔板中，饲喂一段时间后，检测昆虫中靶基因的表达量。本发明通过对饲喂昆虫siRNA的方法进行改进，建立一种提高咀嚼式口器昆虫RNA干扰效率的方法。该方法高效、简单，可操作性强，节约了siRNA的用量，干扰效果明显，为研究咀嚼式口器昆虫基因的功能提供技术支持。
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公开(公告)号：CN103412129A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310298222.1
申请日：2013-07-16
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及防治棉铃虫的两种Bt蛋白最佳浓度配比的筛选方法，所述方法为：（1）选择两种用于防治棉铃虫的Bt蛋白；（2）接种不同抗性水平的棉铃虫幼虫，计算出防治不同抗性水平棉铃虫幼虫时两种Bt蛋白混用的最佳浓度范围；（3）根据最佳浓度范围设定两种Bt蛋白的不同浓度梯度配比，接种不同抗性水平的棉铃虫幼虫，进行生物测定；（4）观察幼虫死亡情况，计算死亡率、LC50和共毒系数CTC，确定两种Bt蛋白不同浓度配比的防治效果。本发明所述方法可操作性强，准确高效，可针对不同地区、不同抗性水平的棉铃虫，明确两种Bt蛋白的浓度配比，可在转双价棉花中Bt蛋白或其他蛋白配比的选择中广泛应用，增加杀虫效果，延缓抗性。
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公开(公告)号：CN105717302B
公开(公告)日：2017-06-16
申请号：CN201610090065.9
申请日：2016-02-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明提供一种评价消化酶在棉铃虫Bt蛋白抗性中作用的方法，其是利用特异性消化酶抑制剂分别处理对Bt蛋白敏感和对Bt蛋白具有抗性的棉铃虫，然后进行生物测定，通过比较所述消化酶抑制剂对抗、感品系棉铃虫的Bt蛋白毒力的抑制效果，来评价所述消化酶抑制剂对应的消化酶在参与Bt蛋白抗性形成中的作用。本发明方法直观、简单，可操作性强，可用于初步分析不同消化酶参与棉铃虫对Bt蛋白抗性形成的作用，为研究昆虫抗性机制及抗性治理提供思路。
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