公开(公告)号：CN105994170A

公开(公告)日：2016-10-12

申请号：CN201610375941.2

申请日：2016-05-31

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 梁革梅 ,  张万娜 ,  马龙 ,  王冰洁 ,  魏纪珍 ,  赵曼

IPC: A01K67/033

CPC classification number: A01K67/033

Abstract: 本发明涉及昆虫饲养，具体公开了一种提高棉铃虫人工饲养效率的装置和方法，所述装置的主体为孔板，孔板的上盖内加入与上盖尺寸相同的吹塑纸。所述方法为利用所述装置饲养棉铃虫至3龄幼虫，挑选生长一致的3龄幼虫转移到养虫管中继续饲养至化蛹。本发明针对低龄棉铃虫幼虫逃逸率高、发育进度不齐、易交叉感染等问题，提出初孵幼虫在24孔板中饲养，增加吹塑纸防止逃逸，3龄后转移到玻璃养虫管中饲养的技术。通过比较加吹塑纸与不加吹塑纸的差异，证明利用吹塑纸对降低幼虫逃逸率、提高发育整齐度具有积极效果。

公开(公告)号：CN105779502A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201610151492.3

申请日：2016-03-16

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 王冰洁 ,  袁向东 ,  梁革梅 ,  张万娜 ,  魏纪珍

IPC: C12N15/87 ,  A01K67/033

CPC classification number: C12N15/87 ,  A01K67/0339 ,  A01K2207/05 ,  A01K2217/058 ,  A01K2227/706 ,  C12N9/485

Abstract: 本发明提供一种提高咀嚼式口器昆虫RNA干扰效率的方法，包括：1)用无RNA酶的水将靶基因特异性siRNA配成一定浓度的溶液；2)将人工饲料加工成3～5mm厚、直径1～2cm的圆片，置于24孔板中；3)取1)的溶液加在2)的圆片上，使溶液被饲料完全吸收；4)将初孵的咀嚼式口器昆虫幼虫，放入3)的有饲料圆片的24孔板中，饲喂一段时间后，检测昆虫中靶基因的表达量。本发明通过对饲喂昆虫siRNA的方法进行改进，建立一种提高咀嚼式口器昆虫RNA干扰效率的方法。该方法高效、简单，可操作性强，节约了siRNA的用量，干扰效果明显，为研究咀嚼式口器昆虫基因的功能提供技术支持。

公开(公告)号：CN105624267B

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201610089908.3

申请日：2016-02-17

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 魏纪珍 ,  梁革梅 ,  王冰洁 ,  陈琳 ,  张万娜

IPC: C12Q1/37

Abstract: 本发明提供一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法，其是将特异性消化酶抑制剂与昆虫中肠消化酶液按比例混合，在体外对Bt蛋白原毒素进行活化，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对活化效果进行分析，用软件ImageJ 1.46对结果进行统计，最后通过方差分析来评价中肠消化酶参与的Bt蛋白活化作用。本方法可操作性强，准确高效，可用于评价哪些不同的消化酶参与了不同类Bt蛋白的活化，同时还可以分析不同消化酶在活化Bt蛋白中的主次作用，对于选择合理的Bt组合杀虫剂或转叠加基因作物具有借鉴作用。此外，该方法可应用于对Bt生化水平抗性的评价工作。

公开(公告)号：CN105624267A

公开(公告)日：2016-06-01

申请号：CN201610089908.3

申请日：2016-02-17

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 魏纪珍 ,  梁革梅 ,  王冰洁 ,  陈琳 ,  张万娜

IPC: C12Q1/37

Abstract: 本发明提供一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法，其是将特异性消化酶抑制剂与昆虫中肠消化酶液按比例混合，在体外对Bt蛋白原毒素进行活化，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对活化效果进行分析，用软件ImageJ 1.46对结果进行统计，最后通过方差分析来评价中肠消化酶参与的Bt蛋白活化作用。本方法可操作性强，准确高效，可用于评价哪些不同的消化酶参与了不同类Bt蛋白的活化，同时还可以分析不同消化酶在活化Bt蛋白中的主次作用，对于选择合理的Bt组合杀虫剂或转叠加基因作物具有借鉴作用。此外，该方法可应用于对Bt生化水平抗性的评价工作。

公开(公告)号：CN105717302B

公开(公告)日：2017-06-16

申请号：CN201610090065.9

申请日：2016-02-17

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 魏纪珍 ,  梁革梅 ,  陈琳 ,  王冰洁 ,  张万娜

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种评价消化酶在棉铃虫Bt蛋白抗性中作用的方法，其是利用特异性消化酶抑制剂分别处理对Bt蛋白敏感和对Bt蛋白具有抗性的棉铃虫，然后进行生物测定，通过比较所述消化酶抑制剂对抗、感品系棉铃虫的Bt蛋白毒力的抑制效果，来评价所述消化酶抑制剂对应的消化酶在参与Bt蛋白抗性形成中的作用。本发明方法直观、简单，可操作性强，可用于初步分析不同消化酶参与棉铃虫对Bt蛋白抗性形成的作用，为研究昆虫抗性机制及抗性治理提供思路。

公开(公告)号：CN105717302A

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201610090065.9

申请日：2016-02-17

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 魏纪珍 ,  梁革梅 ,  陈琳 ,  王冰洁 ,  张万娜

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种评价消化酶在棉铃虫Bt蛋白抗性中作用的方法，其是利用特异性消化酶抑制剂分别处理对Bt蛋白敏感和对Bt蛋白具有抗性的棉铃虫，然后进行生物测定，通过比较所述消化酶抑制剂对抗、感品系棉铃虫的Bt蛋白毒力的抑制效果，来评价所述消化酶抑制剂对应的消化酶在参与Bt蛋白抗性形成中的作用。本发明方法直观、简单，可操作性强，可用于初步分析不同消化酶参与棉铃虫对Bt蛋白抗性形成的作用，为研究昆虫抗性机制及抗性治理提供思路。