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公开(公告)号：CN118879773A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410953376.8
申请日：2024-07-16
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种芜菁花叶病毒P1蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用，通过在TuMV侵染性克隆pCambia2300‑TuMV P1的N端插入Flag‑4×Myc标签和青色荧光蛋白CFP标签，使其能表达出具有标签的Flag‑4×Myc‑P1蛋白和青色荧光的CFP‑P1蛋白。本发明方法构建的重组载体pCambia2300‑TuMV‑Flag‑4×Myc‑P1和pCambia2300‑TuMV‑CFP‑P1具有以下优势：1)插入标签的TuMV仍能系统侵染；2)融合的青色荧光CFP标签可以更清楚的观察在病毒侵染下的P1的真实的亚细胞定位以及P1与融合荧光标签的寄主因子在植物细胞中的共同定位；3)鉴于P1是TuMV重要的功能蛋白，融合标签表达后的蛋白可利用标签抗体进行免疫共沉淀，筛选出与P1互作的寄主蛋白。
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公开(公告)号：CN110150138A
公开(公告)日：2019-08-23
申请号：CN201910474933.7
申请日：2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01H1/02 , A01H1/04 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体的培育方法及应用，本发明的培育方法通过遗传杂交的方式将xpo1a突变体和xpo1b突变体进行杂交，筛选后代获得拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体。通过本发明方法获得的T3代拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体植物能够显著阻碍芜菁花叶病毒(TuMV)的侵染。
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公开(公告)号：CN110150138B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201910474933.7
申请日：2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6895 , A01H1/02 , A01H1/04
Abstract: 本发明公开了一种拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体的培育方法及应用，本发明的培育方法通过遗传杂交的方式将xpo1a突变体和xpo1b突变体进行杂交，筛选后代获得拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体。通过本发明方法获得的T3代拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体植物能够显著阻碍芜菁花叶病毒(TuMV)的侵染。
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公开(公告)号：CN110129362B
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201910476535.9
申请日：2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/82 , C12N15/65 , C12N15/40 , C07K14/08 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种芜菁花叶病毒P3蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用，该方法将Myc标签和Myc‑GFP标签插入到TuMV侵染性克隆pCambia2300‑TuMV中的P3位置的N端，使其能够表达出具有标签的Myc‑P3蛋白和Myc‑GFP‑P3蛋白。构建出的重组载体pCambia2300‑TuMV:Myc‑P3和pCambia2300‑TuMV:Myc‑GFP‑P3具有以下特征和优势：(1)具有侵染性，插入的标签不会影响TuMV的侵染性；(2)能够表达出特异的标签融合蛋白，可用于后续分析TuMV P3蛋白的功能；(3)由于融合蛋白的高表达性，证明P3是TuMV重要的功能基因，可利用标签抗体进行免疫共沉淀，筛选出与P3互作的寄主蛋白；(4)插入具有GFP荧光标签的P3蛋白，能够观察在病毒侵染下的TuMV P3蛋白真实的功能。
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公开(公告)号：CN110129362A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910476535.9
申请日：2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/82 , C12N15/65 , C12N15/40 , C07K14/08 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种芜菁花叶病毒P3蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用，该方法将Myc标签和Myc-GFP标签插入到TuMV侵染性克隆pCambia2300-TuMV中的P3位置的N端，使其能够表达出具有标签的Myc-P3蛋白和Myc-GFP-P3蛋白。构建出的重组载体pCambia2300-TuMV:Myc-P3和pCambia2300-TuMV:Myc-GFP-P3具有以下特征和优势：(1)具有侵染性，插入的标签不会影响TuMV的侵染性；(2)能够表达出特异的标签融合蛋白，可用于后续分析TuMV P3蛋白的功能；(3)由于融合蛋白的高表达性，证明P3是TuMV重要的功能基因，可利用标签抗体进行免疫共沉淀，筛选出与P3互作的寄主蛋白；(4)插入具有GFP荧光标签的P3蛋白，能够观察在病毒侵染下的TuMV P3蛋白真实的功能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117126880B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311145507.1
申请日：2023-09-06
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种本氏烟NbKTI1基因在调控植物抗病毒中的应用及转基因植物培育方法，所述病毒为芜菁花叶病毒，所述NbKTI1基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明使用Gateway体系构建了NbKTI1‑YFP的重组克隆载体，从烟草的cDNA扩增基因NbKTI1，通过BP反应连入pDONR221载体，然后通过LR反应连入含有YFP的重组载体，从而获得含有NbKTI1的过表达载体，通过农杆菌转化的方法将基因导入到烟草中并获得稳定遗传的过表达株系，实验结果表明，NbKTI1的过表达植物能够显著抑制芜菁花叶病毒的侵染。
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公开(公告)号：CN116622739B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202310746907.1
申请日：2023-06-25
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlSUVH2或SlSUVH4基因在调控双生病毒中的应用及转基因植物培育方法，所述双生病毒为番茄黄曲叶病毒，SlSUVH2和SlSUVH4基因的转录本序列如SEQ ID NO:1‑2所示。本发明通过农杆菌转化的方法，将SlSUVH2或SlSUVH4基因导入目的植物中，获得了番茄SlSUVH2或SlSUVH4基因过表达植物，获得的番茄SlSUVH2或SlSUVH4过表达植物能够显著减轻番茄黄曲叶病毒的侵染。
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公开(公告)号：CN116622739A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310746907.1
申请日：2023-06-25
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlSUVH2或SlSUVH4基因在调控双生病毒中的应用及转基因植物培育方法，所述双生病毒为番茄黄曲叶病毒，SlSUVH2和SlSUVH4基因的转录本序列如SEQ ID NO:1‑2所示。本发明通过农杆菌转化的方法，将SlSUVH2或SlSUVH4基因导入目的植物中，获得了番茄SlSUVH2或SlSUVH4基因过表达植物，获得的番茄SlSUVH2或SlSUVH4过表达植物能够显著减轻番茄黄曲叶病毒的侵染。
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公开(公告)号：CN116622648A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310592928.2
申请日：2023-05-24
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N7/00 , C12N1/21 , C12N15/64 , C12N15/65 , C12N15/83 , C12Q1/18 , G01N21/64 , C12R1/94 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种紫藤花叶病毒WiMV及其侵染性克隆载体和应用，所述紫藤花叶病毒WiMV的全基因组序列如SEQ ID NO：1所示；其侵染性克隆载体具体为，将紫藤花叶病毒WiMV全基因组序列构建到pCB301载体而得，命名为pCB301‑WiMV载体；所述pCB301载体中含有35S启动子和核酸酶Rz。该侵染性克隆载体具有稳定的侵染性，在模式植物本氏烟上能够稳定侵染长达50天；而且，该载体不会造成本氏烟生长发育的严重表型，可以对载体加以改造利用。本发明还将GFP插入到WiMV侵染性克隆pCB301‑WiMV中得到pCB301‑WiMV‑GFP，GFP能随着WiMV的系统侵染而在系统叶中表达，因此，该载体能用于外源蛋白表达，作为生物反应器。
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公开(公告)号：CN117126880A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202311145507.1
申请日：2023-09-06
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种本氏烟NbKTI1基因在调控植物抗病毒中的应用及转基因植物培育方法，所述病毒为芜菁花叶病毒，所述NbKTI1基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明使用Gateway体系构建了NbKTI1‑YFP的重组克隆载体，从烟草的cDNA扩增基因NbKTI1，通过BP反应连入pDONR221载体，然后通过LR反应连入含有YFP的重组载体，从而获得含有NbKTI1的过表达载体，通过农杆菌转化的方法将基因导入到烟草中并获得稳定遗传的过表达株系，实验结果表明，NbKTI1的过表达植物能够显著抑制芜菁花叶病毒的侵染。
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