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公开(公告)号：CN108633736A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810450810.5
申请日：2018-05-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开的一种提高紫花苜蓿游离小孢子出胚率的方法，包括在紫花苜蓿盛花期，从供体植株上挑选健壮无病虫害花蕾，选取游离小孢子处于单核居中期的花蕾进行培养。本发明的优点在于，能够快速、高效获得紫花苜蓿的小孢子胚，出胚率达到44.22个/蕾，进而获得的再生植株可用于紫花苜蓿单倍体育种。
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公开(公告)号：CN106591360B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201710123329.0
申请日：2017-03-03
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种高效稳定广谱紫花苜蓿遗传转化方法，包括以下步骤：(1)灭菌材料的准备；(2)农杆菌的准备；(3)侵染；(4)组织培养。本发明建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化体系，为通过转基因技术深入研究并发掘紫花苜蓿的基因功能奠定了基础，也为紫花苜蓿的分子改良创造了条件。本发明将7个品种在相同的背景下(相同的转化载体、相同的插入基因、相同的外植体数)进行比较，较为科学、准确的进行了紫花苜蓿代表性品种(中国东北、华北、西北和国外引进的代表品种)的分子遗传转化研究，能够代表中国大多数紫花苜蓿品种的情况，建立了一个高效、稳定、广谱的紫花苜蓿遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN105505956B
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201610074265.5
申请日：2016-02-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，本发明还公开了一种用于克隆所述的紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD的引物对，核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示。本发明还公开了紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD的制备方法及其在提高拟南芥中的维生素E含量和抗逆性中的应用。本发明为进一步研究紫花苜蓿MsHPPD基因的功能，以及MsHPPD基因改良牧草品质，特别是分子改良牧草维生素E含量的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105861414A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610424213.6
申请日：2016-06-15
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿原生质体的制备方法，涉及生物技术领域，包括选择生长状况良好未开花的紫花苜蓿叶片作为制备原生质体的材料；将制备原生质体的材料进行预处理，得到具有多个叶条的叶片；将所述具有多个叶条的叶片进行酶解处理，得到原生质体酶解液；对所述原生质体酶解液进行纯化处理，得到紫花苜蓿原生质体。本发明制备原生质体成本低、活力高。
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公开(公告)号：CN104450740B
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201410783876.8
申请日：2014-12-16
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/10 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿MsWRKY33转录因子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的编码蛋白，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的制备方法，本发明还公开了一种上述紫花苜蓿MsWRKY33转录因子在提高拟南芥株系耐盐性中的应用。本发明在基因工程改良牧草的研究中，特别是耐盐性改良的转基因新种质创制中发挥重要作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103087999B
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201110343669.7
申请日：2011-11-03
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种由紫花苜蓿γ-生育酚甲基转移酶基因编码的蛋白，其中，该蛋白具有SEQ ID No：2所示的氨基酸序列，或者该蛋白具有将SEQ ID No：2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加后仍具有γ-生育酚甲基转移酶活性的氨基酸序列。本发明还涉及该蛋白的编码基因，以及含有该基因的表达载体和细胞，同时还涉及一种培育α-生育酚含量高的紫花苜蓿的方法和它们的应用。本发明提供的紫花苜蓿γ-生育酚甲基转移酶基因(MSTMT)在紫花苜蓿中的表达可以显著提高紫花苜蓿中α-生育酚的含量。该基因的发现为提高主要牧草植物(特别是豆科植物，如紫花苜蓿)中α-生育酚的含量提供了基因资源，在基因工程改良牧草的研究中将发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN105802978B
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201610396954.8
申请日：2016-06-07
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示，所述的紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM，其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示，所述的紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM在调控植物单荚结实率中发挥作用，丰富了紫花苜蓿种子产量调控研究内容。
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公开(公告)号：CN106636098A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201710053596.5
申请日：2017-01-22
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
CPC classification number: C12N9/0069 , C12N15/8223 , C12N15/8271 , C12Y113/11027
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿HPPD基因的启动子及其制备方法和应用，其基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，该基因的制备方法包括以下步骤：(1)基因组DNA的获取；(2)特异性引物的设计；(3)1st PCR反应；(4)2nd PCR反应；(5)3rd PCR反应；(6)取1st、2nd、3rd PCR反应液各5μl，使用1％的琼脂糖凝胶进行电泳；(7)切胶回收清晰的电泳条带，以SP3Primer为引物对PCR产物进行DNA测序；将测序获得的序列进行拼接，去除重叠序列，最终获得紫花苜蓿HPPD基因的启动子序列。HPPD基因的启动子在调控基因的光/暗反应以及多种逆境反应中起到了重要作用。可以作为一个逆境响应，尤其是光调控响应的启动子使用。
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公开(公告)号：CN106191109A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610574687.9
申请日：2016-07-19
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
CPC classification number: C12N9/001 , C12N15/66 , C12N15/8218 , C12N15/825 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Y103/99029
Abstract: 本发明公开一种鉴定紫花苜蓿MsPDS基因的VIGS沉默体系、应用及鉴定方法，涉及生物技术领域，所述VIGS沉默体系具有如SEQ ID NO.1所示的基因序列，是利用加入了酶切位点的特异性引物扩增的紫花苜蓿cDNA片段及VIGS病毒载体进行重组后得到。本发明构建的沉默体系不但可以在植株内发生繁殖传播，而且沉默效果显著。
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公开(公告)号：CN105505956A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610074265.5
申请日：2016-02-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
CPC classification number: C12N9/0069 , C12N15/8243 , C12Y113/11027
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，本发明还公开了一种用于克隆所述的紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD的引物对，核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示。本发明还公开了紫花苜蓿对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因MsHPPD的制备方法及其在提高拟南芥中的维生素E含量和抗逆性中的应用。本发明为进一步研究紫花苜蓿MsHPPD基因的功能，以及MsHPPD基因改良牧草品质，特别是分子改良牧草维生素E含量的应用奠定了基础。
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