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公开(公告)号:CN106591360B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201710123329.0
申请日:2017-03-03
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种高效稳定广谱紫花苜蓿遗传转化方法,包括以下步骤:(1)灭菌材料的准备;(2)农杆菌的准备;(3)侵染;(4)组织培养。本发明建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化体系,为通过转基因技术深入研究并发掘紫花苜蓿的基因功能奠定了基础,也为紫花苜蓿的分子改良创造了条件。本发明将7个品种在相同的背景下(相同的转化载体、相同的插入基因、相同的外植体数)进行比较,较为科学、准确的进行了紫花苜蓿代表性品种(中国东北、华北、西北和国外引进的代表品种)的分子遗传转化研究,能够代表中国大多数紫花苜蓿品种的情况,建立了一个高效、稳定、广谱的紫花苜蓿遗传转化体系。
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公开(公告)号:CN106591360A
公开(公告)日:2017-04-26
申请号:CN201710123329.0
申请日:2017-03-03
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
CPC classification number: C12N15/8205 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种高效稳定广谱紫花苜蓿遗传转化方法及其获得的转化体系,包括以下步骤:(1)灭菌材料的准备;(2)农杆菌的准备;(3)侵染;(4)组织培养。本发明建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化体系,为通过转基因技术深入研究并发掘紫花苜蓿的基因功能奠定了基础,也为紫花苜蓿的分子改良创造了条件。本发明将7个品种在相同的背景下(相同的转化载体、相同的插入基因、相同的外植体数)进行比较,较为科学、准确的进行了紫花苜蓿代表性品种(中国东北、华北、西北和国外引进的代表品种)的分子遗传转化研究,能够代表中国大多数紫花苜蓿品种的情况,建立了一个高效、稳定、广谱的紫花苜蓿遗传转化体系。
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公开(公告)号:CN106636098A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201710053596.5
申请日:2017-01-22
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
CPC classification number: C12N9/0069 , C12N15/8223 , C12N15/8271 , C12Y113/11027
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿HPPD基因的启动子及其制备方法和应用,其基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,该基因的制备方法包括以下步骤:(1)基因组DNA的获取;(2)特异性引物的设计;(3)1st PCR反应;(4)2nd PCR反应;(5)3rd PCR反应;(6)取1st、2nd、3rd PCR反应液各5μl,使用1%的琼脂糖凝胶进行电泳;(7)切胶回收清晰的电泳条带,以SP3Primer为引物对PCR产物进行DNA测序;将测序获得的序列进行拼接,去除重叠序列,最终获得紫花苜蓿HPPD基因的启动子序列。HPPD基因的启动子在调控基因的光/暗反应以及多种逆境反应中起到了重要作用。可以作为一个逆境响应,尤其是光调控响应的启动子使用。
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公开(公告)号:CN106636098B
公开(公告)日:2018-09-18
申请号:CN201710053596.5
申请日:2017-01-22
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/54
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿HPPD基因的启动子及其制备方法和应用,其基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,该基因的制备方法包括以下步骤:(1)基因组DNA的获取;(2)特异性引物的设计;(3)1st PCR反应;(4)2nd PCR反应;(5)3rd PCR反应;(6)取1st、2nd、3rd PCR反应液各5μl,使用1%的琼脂糖凝胶进行电泳;(7)切胶回收清晰的电泳条带,以SP3Primer为引物对PCR产物进行DNA测序;将测序获得的序列进行拼接,去除重叠序列,最终获得紫花苜蓿HPPD基因的启动子序列。HPPD基因的启动子在调控基因的光/暗反应以及多种逆境反应中起到了重要作用。可以作为一个逆境响应,尤其是光调控响应的启动子使用。
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公开(公告)号:CN106350537A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610798808.8
申请日:2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种东方山羊豆赤霉素受体基因GoGID转化紫花苜蓿的方法。其具体步骤包括:将GoGID基因插入到载体质粒DNA中;将插入有GoGID基因的载体导入到根癌农杆菌LBA4404中;农杆菌的培养;紫花苜蓿外植体的准备及转化;紫花苜蓿转基因植株鉴定、扩繁及评价。东方山羊豆赤霉素受体基因GoGID在紫花苜蓿中超表达后,转基因紫花苜蓿的株高增加了0.2-0.35倍,生物量增加了14.9-46.3%,紫花苜蓿的叶长叶宽也显著高于野生型,此外,开花时间比野生型晚一周,为解析牧草赤霉素信号途径提供理论基础,也为紫花苜蓿产量性状的遗传改良提供可能的候选基因和理论依据。
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公开(公告)号:CN206061758U
公开(公告)日:2017-04-05
申请号:CN201620974006.3
申请日:2016-08-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A01G31/02
CPC classification number: Y02P60/216
Abstract: 本实用新型便于紫花苜蓿根系性状考察的水培装置,包括培养支架、育苗管、遮光托盘,所述遮光托盘为上部开口且表面涂覆有黑漆层的长方体形中空壳体,所述培养支架置于所述遮光托盘内,所述培养支架包括长方形顶板及其下方的支撑架,所述顶板上设置有若干个圆形通孔,所述培养支架的高度高于遮光托盘的高度,所述育苗管为上端开口下端封闭且内部盛有营养液的规则圆柱管,所述育苗管插入通孔内。其目的是为了提供一种在水培育苗时便于操作、方便根系形状考察、能有效提高工作效率、节省育苗成本的便于紫花苜蓿根系性状考察的水培装置。
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