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公开(公告)号：CN112760392B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202011284368.7
申请日：2020-11-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于检测绵羊肺炎支原体的特异性PCR引物，本发明首先通过对绵羊肺炎支原体基因测序和对比，筛选到用于检测绵羊肺炎支原体的靶序列，其基因序列如SEQ ID NO.1所示，然后设计了检测其特异性PCR引物，可将Mo与Mccp、Mmc、精氨酸支原体以及常见反刍动物支原体、细菌区分开，显示出良好的特异性，可作为新诊断靶标，以此为基础建立更具临床实用性的Mo诊断技术。
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公开(公告)号：CN106435016B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201610760228.X
申请日：2016-08-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种快速显色一步法检测猪圆环病毒2型的LAMP试剂盒，该试剂盒包含有6条LAMP引物的LAMP反应液构成的检测体系。本发明的试剂盒在不延长原有1小时反应时间的条件下，实现了将荧光染料直接加入反应管的一步操作，不仅简化了操作程序，解决了含有钙黄素的预混染料对Bst DNA扩增酶的抑制而导致在反应管直接加入荧光染料不显色的根本问题，还有效避免了由于反应结束后二次开盖导致的释放产物形成气溶胶的污染发生。应用本发明的试剂盒进行检测，能够肉眼直接直观判断，具有良好的特异性、敏感性和稳定性。
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公开(公告)号：CN109777762A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910205102.X
申请日：2019-03-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/90 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌基因组基因标签标记方法，包括以下步骤：(1)构建鼠伤寒沙门氏菌/pKD46菌株；(2)构建鼠伤寒沙门氏菌::cpxP::kansacB/pKD46菌株；(3)构建鼠伤寒沙门氏菌::cpxP::3×Flag菌株。本发明可以通过常用的标签单克隆抗体对目的基因在蛋白水平上的表达状况进行分析，既提高了特异性，灵敏度，又省去了制作各个目的基因多克隆抗体或抗体的步骤，为在研究基因在蛋白水品表达变化提供了有力的支持，使研究基因的功能更加的精细，准确。
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公开(公告)号：CN105929179B
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201610381927.3
申请日：2016-06-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种粪肠球菌间接血凝检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括粪肠球菌间接血凝抗原，所述粪肠球菌间接血凝抗原由粪肠球菌CCTCC M 2016027的全菌蛋白和醛化‑鞣酸化绵羊红细胞组成。本发明的试剂盒操作简单、方便快速，无需特殊设备和仪器，全程在2～3小时内完成，适合在基层推广应用，可广泛应用于粪肠球菌病流行病学的调查研究。检测结果重复性好，稳定，可靠，能够准确的检测粪肠球菌的抗体。
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公开(公告)号：CN107356751A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710408511.0
申请日：2017-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C12N15/70 , C07K14/315
CPC classification number: G01N33/56916 , C07K14/315 , C12N15/70 , G01N33/535 , G01N33/543 , G01N2333/315
Abstract: 一种羊源屎肠球菌间接ELISA检测方法，属于微生物检测技术领域，以上羊源屎肠球菌间接ELISA检测方法专用试剂制备过程与监测方法包括如下步骤：血清制备、免疫激活、Acm抗原制备、ELISA方法的最优工作条件。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106093439A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610383147.2
申请日：2016-06-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/86 , G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/86 , G01N33/531 , G01N33/56944
Abstract: 本发明提供一种猪链球菌间接血凝检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括猪链球菌间接血凝抗原，所述猪链球菌间接血凝抗原由猪链球菌CCTCC M 2016028的全菌蛋白和醛化‑鞣酸化绵羊红细胞组成。本发明的试剂盒操作简单、方便快速，无需特殊设备和仪器，全程在2～3小时内完成，适合在基层推广应用，可广泛应用于猪链球菌病流行病学的调查研究。结果的重复性好，稳定，可靠，能够准确的检测猪链球菌的抗体。
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公开(公告)号：CN102363042B
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201110303276.3
申请日：2011-10-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , C12N15/85 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种C型口蹄疫亚单位基因工程疫苗及其制备方法。本发明的C型口蹄疫亚单位疫苗的主要组成为由C型口蹄疫的结构蛋白VP1和VP3按蛋白含量1∶1构成的混合物，其中的C型口蹄疫病毒的结构蛋白VP1和VP3为C型口蹄疫病毒基因VP1和VP3的真核表达产物，特别是C型口蹄疫抗原基因VP1和VP3在中国仓鼠卵巢细胞(即胞CHO/dhfr-细胞)表达系统表达的产物。
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公开(公告)号：CN101260155A
公开(公告)日：2008-09-10
申请号：CN200810090550.1
申请日：2008-03-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开抗牛成熟朊蛋白的单克隆抗体mab－mPrP－N59及其应用。本发明的单抗是mab－mPrP－N59；其制备方法是以牛mPrP编码基因为目的产物选择模板与引物，用聚合酶链式反应扩增出牛mPrP编码基因，经酶切后将酶切产物与原核表达载体连接，再转入E.Coli JM109感受态细胞中培养，提取含有牛mPrP编码基因的重组表达质粒转入E.Coli JM109(DE3)中诱导表达，以经纯化复性的表达产物为免疫原免疫小鼠，取免疫鼠的脾细胞与鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出杂交瘤细胞株，并克隆出阳性杂交瘤细胞株，在鼠体内接种杂交瘤细胞生产腹水抗体，取出腹水进行纯化得到抗牛成熟朊蛋白的单抗。
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公开(公告)号：CN109554311B
公开(公告)日：2022-01-14
申请号：CN201811548607.8
申请日：2018-12-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法，包括下述步骤：(1)将沙门氏菌菌液，进行10,000×g，4℃，15min离心；(2)回收上清，不要将菌液沉淀倒出，进行13,000×g，4℃，15min离心；(3)回收上清，用PVDF膜滤器进行过滤2次；(4)将过滤的上清进行40,000×g，4℃，2h；弃去上清。本发明应用的高速离心的方案，用40,000×g的离心力成功的对鼠伤寒沙门氏菌的OMVs进行了提取。本发明还解决了鞭毛在OMVs提取物种大量存在的问题，本发明通过应用基因靶向编辑技术对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛基因进行敲除，从而获得高纯度的OMVs。
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公开(公告)号：CN111323602A
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN202010178953.2
申请日：2020-03-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种筛选绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊肺炎亚种血清学阴性羊的iELISA方法，包括如下步骤：(1)将山羊支原体山羊肺炎亚种1801菌株接于MTB培养基中扩培后，菌液离心、灭菌、PBS超声重悬，分离得到抗原；(2)用所述抗原包被酶标板，37℃温箱1h后4℃过夜；加入封闭液，37℃封闭2h；加入200倍稀释的血清样品，37℃孵育1h；加入用5％脱脂奶粉稀释5000倍的兔抗羊二抗，37℃孵育1h；(3)用PBST洗板后加入TMB显色液，37℃孵育10min；加入终止液终止反应；酶标仪读取OD450nm值。本发明iELISA方法敏感性可达98％，操作简单，样本处理量大，不仅可用于Mccp和Mo两种病原血清学阴性羊的筛选，还可用于实验中Mccp抗体水平的监测。
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