公开(公告)号：CN116286926B

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202310177034.7

申请日：2023-02-28

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 王少辉 ,  张贝贝 ,  田明星 ,  祁晶晶 ,  鲍衍清 ,  汪洋 ,  贾艳艳 ,  曹战鑫

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6897 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种双荧光报告质粒、质粒的构建以及在检测大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平中的应用。该报告质粒由抗性基因、启动子、第一报告基因、终止子、第二报告基因、核糖开关组成。含有的两个报告基因mCherry和EGFP，分别受启动子和核糖开关控制，第一报告基因用于检测质粒本底表达水平，第二报告基因用于检测c‑di‑GMP水平，且第一报告基因和第二报告基因的方向相反，二者的表达互相不受干扰，可消除质粒拷贝数对c‑di‑GMP水平检测结果的影响，检测结(56)对比文件张贝贝等.检测大肠杆菌内c-di-GMP 水平的双荧光素报告质粒的构建及应用《.微生物学报》.2023,第1-11页.李新风等.环二鸟苷单磷酸核糖开关的结构与功能《.生物工程学报》.2017,第33卷(第9期),第1357-1368页.Blokesch,M..Vibrio cholerae C6706chromosome 1, complete sequence《.GenbankDatabase》.2020,Accession No.CP047295.1.

公开(公告)号：CN116286926A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310177034.7

申请日：2023-02-28

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 王少辉 ,  张贝贝 ,  田明星 ,  祁晶晶 ,  鲍衍清 ,  汪洋 ,  贾艳艳 ,  曹战鑫

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6897 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种双荧光报告质粒、质粒的构建以及在检测大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平中的应用。该报告质粒由抗性基因、启动子、第一报告基因、终止子、第二报告基因、核糖开关组成。含有的两个报告基因mCherry和EGFP，分别受启动子和核糖开关控制，第一报告基因用于检测质粒本底表达水平，第二报告基因用于检测c‑di‑GMP水平，且第一报告基因和第二报告基因的方向相反，二者的表达互相不受干扰，可消除质粒拷贝数对c‑di‑GMP水平检测结果的影响，检测结果更准确、更可靠。本发明构建的双荧光报告质粒可以对大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平进行快速检测，操作简单，结果可靠。