公开(公告)号：CN118956961A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411428497.7

申请日：2024-10-14

Applicant: 中国农业大学三亚研究院

Inventor： 吴森 ,  杜旭光 ,  段小月 ,  郭亮 ,  杜唱 ,  侯乃鹏 ,  陈超磊

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种用于分离多基因纯合编辑细胞的报告质粒和筛选方法。报告质粒包括目标区域靶位点插入序列和携带荧光蛋白的报告基因的质粒骨架；目标区域靶位点插入序列在报告基因的起始密码子后插入；目标区域靶位点插入序列包括：需同时编辑的所有基因或所有目标区域靶位点序列中打靶效率最低的目标区域靶位点序列，以及目标区域靶位点插入序列的序列长度为非3的倍数、且不含起始密码子和终止密码子。筛选方法的步骤包括：将基因编辑质粒以及报告质粒共转染入目的细胞；转染后，分选出阳性细胞群，得到同时编辑的多基因纯合编辑细胞。本发明的目的是解决现有技术无法从目的细胞中有效分离出多基因编辑细胞问题。

公开(公告)号：CN119351469A

公开(公告)日：2025-01-24

申请号：CN202411919108.0

申请日：2024-12-25

Applicant: 中国农业大学三亚研究院 ,  中国热带农业科学院三亚研究院

Inventor： 张立兰 ,  吴森 ,  杜旭光 ,  高菲 ,  余卓营 ,  侯乃鹏 ,  王晓哲

IPC: C12N15/85 ,  A61K31/7105 ,  A61P3/04 ,  A61P25/28 ,  A61P9/10 ,  A61P11/00 ,  A61P19/02 ,  A61P3/10 ,  A61P25/14 ,  A61P25/16 ,  A23K20/153 ,  A23K20/147 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种抑制KCNK3基因的物质及其在调控脂肪代谢或铁死亡中的应用。本发明利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除和过表达细胞系，发现KCNK3敲除抑制猪前脂肪细胞的脂质合成与积累、促进脂肪水解产热。进一步利用转录组和脂质组联合分析的技术，对KCNK3基因敲除细胞进行了分析，发现KCNK3调控脂肪代谢和铁死亡生物学过程。通过检测KCNK3敲除PK15细胞内铁含量、ROS水平、谷胱甘肽水平，线粒体形态特征等，证明了KCNK3敲除促进铁死亡。本发明首次发现KCNK3基因在促进猪脂肪形成、抑制铁死亡中的作用，该发现对于利用KCNK3基因对猪进行脂肪沉积调控以及人类肥胖和铁死亡相关疾病的治疗具有重要意义。