公开(公告)号：CN103757037A

公开(公告)日：2014-04-30

申请号：CN201310692299.7

申请日：2013-12-17

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 侯健 ,  麻富强 ,  安晓荣

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N9/22 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种诱导表达锌指核酸酶的载体及其应用。该载体含有ColE1ori、Ampr基因，以及四个表达盒；从上游到下游，表达盒1依次包括PCMV？IE、Puror和SV40polyA，表达盒2依次包括PCMV、rtTA-Advanced和SV40polyA，表达盒3依次包括TREmod、PminCMV、DNA片段1和SV40polyA，表达盒4依次包括TREmod、PminCMV、DNA片段2和SV40polyA。实验证明，本发明具有如下优点：本发明所提供载体中带有一个用于药物筛选的基因，在转染效率低的条件下便于筛选和富集阳性细胞；本发明所提供载体将两个ZFN质粒整合到一起，故只要转染单个质粒即可，简化了转染环节；采用可诱导表达ZFNs的方法，控制ZFNs的表达时机，降低ZFNs对细胞的毒性。

公开(公告)号：CN103757037B

公开(公告)日：2016-04-27

申请号：CN201310692299.7

申请日：2013-12-17

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 侯健 ,  麻富强 ,  安晓荣

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N9/22 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种诱导表达锌指核酸酶的载体及其应用。该载体含有ColE1ori、Ampr基因，以及4个表达盒；从上游到下游，表达盒1依次包括PCMV IE、Puror和SV40polyA，表达盒2依次包括PCMV、rtTA-Advanced和SV40polyA，表达盒3依次包括TREmod、PminCMV、DNA片段1和SV40polyA，表达盒4依次包括TREmod、PminCMV、DNA片段2和SV40polyA。实验证明，本发明具有如下优点：本发明所提供载体中带有一个用于药物筛选的基因，在转染效率低的条件下便于筛选和富集阳性细胞；本发明所提供载体将两个ZFN质粒整合到一起，故只要转染单个质粒即可，简化了转染环节；采用可诱导表达ZFNs的方法，控制ZFNs的表达时机，降低ZFNs对细胞的毒性。