公开(公告)号：CN104531704B

公开(公告)日：2019-05-21

申请号：CN201410751079.1

申请日：2014-12-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 侯健 ,  厉建伟 ,  安晓荣

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种利用CRISPR‑Cas9系统敲除动物FGF5基因的方法。本发明首先获得针对FGF5第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；接着构建FGF5第二外显子的sgRNA表达结构，并将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前，同时构建Cas9蛋白的体外转录载体，以T7启动子调控。利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9 mRNA和sgRNA，可用于生产敲除FGF5基因的动物。

公开(公告)号：CN104531705A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410751563.4

申请日：2014-12-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 侯健 ,  厉建伟 ,  安晓荣

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种利用CRISPR-Cas9系统敲除动物myostatin基因的方法。本发明首先获得针对myostatin第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；接着构建myostatin第二外显子的sgRNA表达结构，并将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前，同时构建Cas9蛋白的体外转录载体，以T7启动子调控。利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9mRNA和sgRNA，可用于生产敲除myostatin基因的动物。

公开(公告)号：CN104531704A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410751079.1

申请日：2014-12-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 侯健 ,  厉建伟 ,  安晓荣

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种利用CRISPR-Cas9系统敲除动物FGF5基因的方法。本发明首先获得针对FGF5第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；接着构建FGF5第二外显子的sgRNA表达结构，并将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前，同时构建Cas9蛋白的体外转录载体，以T7启动子调控。利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9 mRNA和sgRNA，可用于生产敲除FGF5基因的动物。