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公开(公告)号:CN110777217B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN201911237280.7
申请日:2019-12-05
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6811 , C12N15/11
Abstract: 蛹虫草子实体发育阶段内参基因、引物、筛选方法及应用,所述内参基因为TUB,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。TUB的正向、反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:13‑14。所述筛选方法为:(1)选择12个内参基因为备选内参基因,设计引物;(2)诱导蛹虫草子实体发育,提取不同发育阶段的总RNA,测定RNA浓度,将RNA反转录合成cDNA,以cDNA为模板,利用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析;(3)实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析,筛选出稳定内参基因。所述应用是以TUB为内参基因,检测目的基因不同发育阶段的相对表达量。所述内参基因稳定性好;所述方法简单、快捷、成本低。
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公开(公告)号:CN105821101A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610378598.7
申请日:2016-06-01
Applicant: 中南林业科技大学
CPC classification number: C07K7/06
Abstract: 本发明公开了一种发酵制备米渣蛋白抗氧化肽的方法,包括如下步骤:(1)利用霉菌对米渣进行固态发酵:在米渣中加入水,米渣和水的重量比为(15?25):9,搅拌浸润,灭菌后接种霉菌于30?35℃条件下进行前期发酵2?4天,得成曲;然后于40?42℃条件下进行后期发酵4?6天,得发酵产物;(2)将发酵产物通过超滤膜、凝胶层析过滤、制备型RP?HPLC进行抗氧化产物的分离纯化;即得米渣蛋白抗氧化肽F2d和F2e,所述F2d序列如SEQ ID NO.1所示,所述F2e序列如SEQ ID NO.2所示。利用霉菌固态发酵米渣制取抗氧化产物,可极大降低米渣综合利用的生产成本,丰富了米渣作为食品原料的应用范围,提高了米渣综合利用的技术水平和商品价值,并且为天然抗氧化产物的研究开辟了新途径。
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公开(公告)号:CN110777217A
公开(公告)日:2020-02-11
申请号:CN201911237280.7
申请日:2019-12-05
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6811 , C12N15/11
Abstract: 蛹虫草子实体发育阶段内参基因、引物、筛选方法及应用,所述内参基因为TUB,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。TUB的正向、反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:13-14。所述筛选方法为:(1)选择12个内参基因为备选内参基因,设计引物;(2)诱导蛹虫草子实体发育,提取不同发育阶段的总RNA,测定RNA浓度,将RNA反转录合成cDNA,以cDNA为模板,利用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析;(3)实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析,筛选出稳定内参基因。所述应用是以TUB为内参基因,检测目的基因不同发育阶段的相对表达量。所述内参基因稳定性好;所述方法简单、快捷、成本低。
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公开(公告)号:CN115044636A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210588715.8
申请日:2022-05-26
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种提高虫草素产量的蛹虫草液体发酵方法,属于生物发酵技术领域。本发明通过在蛹虫草发酵一段时间后补加适量的鱼藤酮,可显著提高蛹虫草发酵液中虫草素的产量。相较于未添加鱼藤酮的传统发酵的产量189.66mg/L,鱼藤酮添加后产量高达804.69mg/L,即虫草素总产量提高了324.28%。该方法工艺简单,无需通过基因改造等手段提升酶活;生产成本低,无需源源不断的补料腺嘌呤等虫草素合成所需底物,且虫草素总的发酵时间较短,生产效率明显提高,适合工业化生产。
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公开(公告)号:CN106434529A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201610932351.5
申请日:2016-10-25
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12N5/071
CPC classification number: C12N5/0692 , C12N2501/115 , C12N2501/165 , C12N2501/998
Abstract: 本发明涉及一种内皮祖细胞氧化应激模型的构建方法,将购买的人外周血单个核细胞接种在人纤连蛋白涂层(FN)的培养皿中培养,加入M199培养基,培养箱中培养。3天后洗去未贴壁细胞,添加培养液继续培养,以后每隔3天换培养液。用胰酶消化细胞制成细胞悬液,取适量的内皮祖细胞悬液,加入等体积的氧化低密度脂蛋白,其终浓度为100μg/mL,培养箱中培养24h。将细胞再次用胰酶消化,离心后,细胞样用MTT法测定其生长抑制率,用流式细胞仪测定凋亡情况,并测定活性氧,GSH-Px和线粒体膜电位等代表其氧化应激情况的参数。本发明提供了一种在细胞水平研究抗氧化物质及其机理的模型,且是首次用氧化低密度脂蛋白作为诱导物建立内皮祖细胞氧化应激模型。
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公开(公告)号:CN115044636B
公开(公告)日:2025-03-14
申请号:CN202210588715.8
申请日:2022-05-26
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种提高虫草素产量的蛹虫草液体发酵方法,属于生物发酵技术领域。本发明通过在蛹虫草发酵一段时间后补加适量的鱼藤酮,可显著提高蛹虫草发酵液中虫草素的产量。相较于未添加鱼藤酮的传统发酵的产量189.66mg/L,鱼藤酮添加后产量高达804.69mg/L,即虫草素总产量提高了324.28%。该方法工艺简单,无需通过基因改造等手段提升酶活;生产成本低,无需源源不断的补料腺嘌呤等虫草素合成所需底物,且虫草素总的发酵时间较短,生产效率明显提高,适合工业化生产。
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公开(公告)号:CN110791585B
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN201911237264.8
申请日:2019-12-05
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 蛹虫草菌丝体冷胁迫下内参基因、引物、筛选方法及应用,所述内参基因为UBC,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。UBC的正向、反向引物的核苷酸序列依次为SEQ ID NO:13‑14。所述筛选方法为:(1)选择12个内参基因为备选内参基因,设计引物;(2)将蛹虫草冷胁迫处理,提取菌丝体总RNA,测RNA浓度,将RNA反转录合成cDNA,以cDNA为模板,用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析;(3)实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析,筛选出稳定内参基因。所述应用是以UBC为内参基因,用实时荧光定量PCR检测目的基因在冷胁迫下的相对表达量。所述内参基因稳定性好;所述方法简单、快捷、成本低。
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公开(公告)号:CN110791585A
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201911237264.8
申请日:2019-12-05
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 蛹虫草菌丝体冷胁迫下内参基因、引物、筛选方法及应用,所述内参基因为UBC,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。UBC的正向、反向引物的核苷酸序列依次为SEQ ID NO:13-14。所述筛选方法为:(1)选择12个内参基因为备选内参基因,设计引物;(2)将蛹虫草冷胁迫处理,提取菌丝体总RNA,测RNA浓度,将RNA反转录合成cDNA,以cDNA为模板,用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析;(3)实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析,筛选出稳定内参基因。所述应用是以UBC为内参基因,用实时荧光定量PCR检测目的基因在冷胁迫下的相对表达量。所述内参基因稳定性好;所述方法简单、快捷、成本低。
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