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公开(公告)号:CN114181952A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111422941.0
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种提高纤维素酶活的基因、蛋白和菌株,基因为trans1基因,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;菌株为黑曲霉Trans,由pCAMBIA1300‑trans1重组质粒转化至黑曲霉CBS S13.88而得;菌株的构建方法包括:对pCAMBIA1300质粒和trans1基因进行Sal I和Hind III酶切,多酶切产物电泳、胶回收;对胶回收产物进行连接,得重组质粒pCAMBIA1300‑trans1;将重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞中,并提取重组质粒;将提取的重组质粒转化农杆菌中,并以农杆菌介导侵染黑曲霉菌,获得黑曲霉Trans菌。
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公开(公告)号:CN114015677A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111421128.1
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种促进中药饲料添加剂在肠道释放的纤维素酶,纤维素酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该酶的序列如SEQ ID NO.2所示;纤维素酶的生产方法,包括:以合成的序列Endo1为模板,进行PCR,获得目的基因;对目的基因和pRSFduet‑1质粒进行BamHI和EcoRI双酶切,然后连接酶切产物,获得重组质粒pET28a‑endo;将重组质粒pET28a‑endo转化至大肠杆菌感受态细胞中,获得转化菌株;对转化菌株进行诱导培养,离心、取上清、纯化,得纤维素酶。
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公开(公告)号:CN114145384B
公开(公告)日:2024-02-13
申请号:CN202111434592.4
申请日:2021-11-29
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种增加赖氨酸含量的固态发酵方法,属于微生物发酵技术领域。通过特制的培养基和培养条件,对厚朴粉、山楂粉、淫羊藿粉、膨润土、麦饭石和小麦麸皮进行发酵,最终能够获得高赖氨酸含量的固态发酵饲料,禽食用后能够明显增加日增重率,为高赖氨酸固体发酵打下基础。
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公开(公告)号:CN114164227A
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202111421152.5
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种适配中药饲料发酵的纤维素酶高表达菌株的构建方法,属于基因工程技术领域。本发明公开的一种适配中药饲料发酵的纤维素酶高表达菌株的构建方法,包括:合成基因片段:GTCGAC‑膜泡融合蛋白编码序列‑AAGCTT;分别将合成的基因片段和pCAMBIA1300质粒进行双酶切,连接,转化,提质粒,获得pCAMBIA1300‑B;农杆菌介导pCAMBIA1300‑B转化黑曲霉,并筛选获得黑曲霉菌株136。黑曲霉菌株136发酵液的滤纸酶活为2.6U/mL,纤维素内切酶酶活29.2U/mL,β‑葡糖苷酶酶活为21.3U/mL,纤维素外切酶酶活为0.43U/mL。
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公开(公告)号:CN114196695A
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202111422922.8
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
IPC: C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种高活性中药饲料添加剂胰蛋白酶的构建方法,属于基因工程技术领域。本发明公开的一种高活性中药饲料添加剂胰蛋白酶的构建方法,通过基因突变技术(易错PCR),得到一个在37℃具有更高活性的胰蛋白酶,比酶活为2436(BAEE单位)/mg。该酶在饲料领域具有广阔的应用前景,对养殖行业具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN114145390A
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202111435984.2
申请日:2021-11-29
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种强营养疗热应激的中药发酵饲料添加剂的制备方法,属于生物工程技术领域;包括如下步骤:(1)粉料混合;(2)初次发酵;(3)二次发酵;(3)三次发酵;(4)呼吸袋发酵。通过本发明方法制备的中药发酵饲料添加剂赖氨酸含量高,将其添加到奶牛饲料中,可提高营养供应,降低热应激反应,提高奶牛高温季节产奶量。
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公开(公告)号:CN114015676B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202111421067.9
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种适配中药饲料添加剂的纤维素酶的构建方法,涉及基因工程技术领域。纤维素酶核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明得到一种在肠胃环境温度下,具有更高酶催化活性的单体纤维素酶。构建的酶为一种新型的,能在肠胃环境温度下高效促进中药纤维素的溶解,进而促进有效成分快速释放的纤维素酶。
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公开(公告)号:CN114145384A
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202111434592.4
申请日:2021-11-29
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种增加赖氨酸含量的固态发酵方法,属于微生物发酵技术领域。通过特制的培养基和培养条件,对厚朴粉、山楂粉、淫羊藿粉、膨润土、麦饭石和小麦麸皮进行发酵,最终能够获得高赖氨酸含量的固态发酵饲料,禽食用后能够明显增加日增重率,为高赖氨酸固体发酵打下基础。
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公开(公告)号:CN114015676A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111421067.9
申请日:2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor: 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种适配中药饲料添加剂的纤维素酶的构建方法,涉及基因工程技术领域。纤维素酶核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明得到一种在肠胃环境温度下,具有更高酶催化活性的单体纤维素酶。构建的酶为一种新型的,能在肠胃环境温度下高效促进中药纤维素的溶解,进而促进有效成分快速释放的纤维素酶。
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