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公开(公告)号：CN114145384B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202111434592.4
申请日：2021-11-29
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种增加赖氨酸含量的固态发酵方法，属于微生物发酵技术领域。通过特制的培养基和培养条件，对厚朴粉、山楂粉、淫羊藿粉、膨润土、麦饭石和小麦麸皮进行发酵，最终能够获得高赖氨酸含量的固态发酵饲料，禽食用后能够明显增加日增重率，为高赖氨酸固体发酵打下基础。
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公开(公告)号：CN114164227A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111421152.5
申请日：2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种适配中药饲料发酵的纤维素酶高表达菌株的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种适配中药饲料发酵的纤维素酶高表达菌株的构建方法，包括：合成基因片段：GTCGAC‑膜泡融合蛋白编码序列‑AAGCTT；分别将合成的基因片段和pCAMBIA1300质粒进行双酶切，连接，转化，提质粒，获得pCAMBIA1300‑B；农杆菌介导pCAMBIA1300‑B转化黑曲霉，并筛选获得黑曲霉菌株136。黑曲霉菌株136发酵液的滤纸酶活为2.6U/mL，纤维素内切酶酶活29.2U/mL，β‑葡糖苷酶酶活为21.3U/mL，纤维素外切酶酶活为0.43U/mL。
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公开(公告)号：CN114015677A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111421128.1
申请日：2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种促进中药饲料添加剂在肠道释放的纤维素酶，纤维素酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该酶的序列如SEQ ID NO.2所示；纤维素酶的生产方法，包括：以合成的序列Endo1为模板，进行PCR，获得目的基因；对目的基因和pRSFduet‑1质粒进行BamHI和EcoRI双酶切，然后连接酶切产物，获得重组质粒pET28a‑endo；将重组质粒pET28a‑endo转化至大肠杆菌感受态细胞中，获得转化菌株；对转化菌株进行诱导培养，离心、取上清、纯化，得纤维素酶。
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公开(公告)号：CN114181952A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111422941.0
申请日：2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种提高纤维素酶活的基因、蛋白和菌株，基因为trans1基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；菌株为黑曲霉Trans，由pCAMBIA1300‑trans1重组质粒转化至黑曲霉CBS S13.88而得；菌株的构建方法包括：对pCAMBIA1300质粒和trans1基因进行Sal I和Hind III酶切，多酶切产物电泳、胶回收；对胶回收产物进行连接，得重组质粒pCAMBIA1300‑trans1；将重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞中，并提取重组质粒；将提取的重组质粒转化农杆菌中，并以农杆菌介导侵染黑曲霉菌，获得黑曲霉Trans菌。
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公开(公告)号：CN117965494A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410308427.1
申请日：2024-03-18
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 王伟 , 曾徐浩 , 任雅楠 , 姜本荣 , 孙赫 , 刘巨宏 , 梁大明 , 胡燕 , 田美华 , 齐义清 , 沈力 , 夏胜 , 夏珂 , 陈彩云 , 潘琳 , 李洞刚 , 吕灿军
Abstract: 本发明公开一种在牛胃环境下高活性的玉米赤霉烯酮降解酶的构建方法，所述玉米赤霉烯酮降解酶突变体以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的玉米赤霉烯酮降解酶为亲本，于亲本第33位和第34位之间插入苏氨酸、苏氨酸、亮氨酸、亮氨酸、亮氨酸，第145位和第146位之间插入丝氨酸、赖氨酸、丝氨酸、丝氨酸、亮氨酸、亮氨酸得到的。本发明提供的技术方案中，通过定点突变和插入片段序列的生物技术改造玉米赤霉烯酮降解酶分子结构，获得玉米赤霉烯酮降解酶突变体，该突变体在pH 6.0左右的酸性环境下具有更高的酶活性，在牛胃里酸性环境下利用突变的玉米赤霉烯酮降解酶充分降解玉米赤霉烯酮。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117965493A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410161603.3
申请日：2024-02-05
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 薛栋升 , 王玉万 , 王伟 , 曾徐浩 , 任雅楠 , 姜本荣 , 刘巨宏 , 梁大明 , 胡燕 , 田美华 , 齐义清 , 沈力 , 夏珂 , 陈彩云 , 吕灿军 , 潘琳 , 李洞刚 , 孙赫
Abstract: 本发明公开一种在养殖水体环境下高活性的玉米赤霉烯酮降解酶的构建方法，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明提供的技术方案中，通过定点突变生物技术改造玉米赤霉烯酮降解酶分子结构，获得玉米赤霉烯酮降解酶突变体，该突变体在在28‑30℃(鱼类养殖水体的适宜温度)下具有更高的酶活性。
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公开(公告)号：CN114196695A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111422922.8
申请日：2021-11-26
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
IPC: C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种高活性中药饲料添加剂胰蛋白酶的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种高活性中药饲料添加剂胰蛋白酶的构建方法，通过基因突变技术(易错PCR)，得到一个在37℃具有更高活性的胰蛋白酶，比酶活为2436(BAEE单位)/mg。该酶在饲料领域具有广阔的应用前景，对养殖行业具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN114145390A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202111435984.2
申请日：2021-11-29
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 薛栋升 , 蒋慧 , 梁大明 , 田美华 , 胡燕 , 夏胜 , 王伟 , 任雅楠 , 于晶晶 , 刘佳丽 , 孙赫 , 孙哲 , 刘艳辉 , 曾徐浩 , 张耀 , 齐义清 , 沈力 , 游王丹
Abstract: 本发明公开了一种强营养疗热应激的中药发酵饲料添加剂的制备方法，属于生物工程技术领域；包括如下步骤：(1)粉料混合；(2)初次发酵；(3)二次发酵；(3)三次发酵；(4)呼吸袋发酵。通过本发明方法制备的中药发酵饲料添加剂赖氨酸含量高，将其添加到奶牛饲料中，可提高营养供应，降低热应激反应，提高奶牛高温季节产奶量。
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公开(公告)号：CN118006583A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410308426.7
申请日：2024-03-18
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 薛栋升 , 姜本荣 , 王玉万 , 王伟 , 曾徐浩 , 任雅楠 , 刘巨宏 , 梁大明 , 胡燕 , 田美华 , 齐义清 , 沈力 , 夏珂 , 陈彩云 , 潘琳 , 吕灿军 , 李洞刚
Abstract: 本发明公开一种在鸡的腺胃和肌胃环境下高活性的玉米赤霉烯酮降解酶的构建方法，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明提供的技术方案中，通过定点突变和插入片段序列的生物技术改造玉米赤霉烯酮降解酶分子结构，获得玉米赤霉烯酮降解酶突变体，该突变体在pH 4.0左右的酸性环境下具有更高的酶活性，使得玉米赤霉烯酮在鸡的腺胃和肌胃里能够被充分降解。
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公开(公告)号：CN117947008A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410124258.6
申请日：2024-01-30
Applicant: 中农华威生物制药(湖北)有限公司
Inventor： 游锡火 , 王玉万 , 姜本荣 , 薛栋升 , 王伟 , 曾徐浩 , 任雅楠 , 刘巨宏 , 梁大明 , 胡燕 , 田美华 , 齐义清 , 沈力 , 吕灿军 , 夏珂 , 陈彩云 , 潘琳 , 李洞刚
Abstract: 本发明公开了一种在猪胃环境下玉米赤霉烯酮高效降解酶的构建方法，涉及基因工程技术领域，所述突变体以SEQ ID NO.1所示的玉米赤霉烯酮降解酶为亲本，分别将亲本第92位氨基酸突变为赖氨酸、第114位氨基酸突变为亮氨酸、第117位氨基酸突变为色氨酸、第140位氨基酸突变位精氨酸、第153位氨基酸突变位甲硫氨酸、第157位氨基酸突变位缬氨酸、第220位氨基酸突变为色氨酸而得到；得到的玉米赤霉烯酮降解酶突变体酶活性、热稳定性高，更加适应猪体内环境。
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