公开(公告)号：CN1693461A

公开(公告)日：2005-11-09

申请号：CN200510039063.9

申请日：2005-04-26

Applicant: 东南大学

Inventor： 谢维 ,  马达 ,  金俊飞 ,  张建琼

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C07K16/40 ,  C12P21/08 ,  C12N5/18 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/53

Abstract: 抗醛糖还原酶蛋白“AR”单克隆抗体的制备与鉴定方法产生的抗AR单克隆抗体分别高度特异抗AR抗原的不同区段；产生的抗AR单克隆抗体可以作为一种新的肝癌早期诊断辅助试剂：联合应用抗AR单克隆抗体和抗醛糖还原酶相似蛋白“ARL－1”单克隆抗体，可能找到一个新的、特异性高的肝癌早期诊断指标，将有助于肝癌的早期诊断，从而提高肝癌的生存率，改善其预后。经鉴定，由纯化ARB3、AR7B3G4、ARF10细胞株的培养上清而得到的三株抗AR单克隆抗体，Ig亚类均为IgG1，轻链属于κ型；均抗GST－AR，并与胎盘组织中的AR蛋白反应，且分别识别AR第1～79氨基酸、第111～142氨基酸、第143～316氨基酸位置，而与GST－ARL、GST、表达菌液蛋白无交叉反应。

公开(公告)号：CN1544636A

公开(公告)日：2004-11-10

申请号：CN200310106354.6

申请日：2003-11-19

Applicant: 东南大学

Inventor： 谢维 ,  金俊飞 ,  张建琼 ,  单军

IPC: C12N15/53 ,  C12P21/08 ,  G01N33/577

Abstract: 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法，属于生物工程开发新型肝癌诊断试剂的技术领域。其制备的方法是采用基因重组的方法表达、纯化ARL－GST重组蛋白，将ARL－GST免疫小鼠制备脾细胞悬液，在聚乙二醇作用下与处于对数生长期的Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合，经过杂交瘤抗体检测与数次克隆，得到稳定分泌抗ARL－1单克隆抗体的一株细胞，命名为F9。经测定F9分泌的抗ARL－1单克隆抗体属IgG2b亚型，轻链为κ型，其腹水效价为1∶4×10－5。经鉴定F9分泌的单克隆抗体只对ARL－1蛋白反应，而对与ARL－1蛋白具有较高同源性的醛糖还原酶都不起作用，说明上述单克隆抗体是特异性抗ARL－1蛋白的。

公开(公告)号：CN1403482A

公开(公告)日：2003-03-19

申请号：CN02138415.0

申请日：2002-10-11

Applicant: 东南大学

Inventor： 金俊飞 ,  谢维

IPC: C07K16/18 ,  C12N15/09 ,  C12N15/70

Abstract: 抗醛糖述原酶相似蛋白多克隆抗体的制备方法，是一种多克隆抗体的制备方法，属于生物工程开发新型肝癌诊断、治疗试剂的技术领域。采用基因重组的方法表达、纯化两种ARL－1的重组蛋白：ARL－(His)6、ARL－GST，将ARL－(His)6免疫家兔制备抗血清，采用亲和层析的方法，以ARL－GST为配基，从血清中纯化出抗ARL－1的多克隆抗体。其制备的工艺为：a)ARL－1重组质粒构建；b)两种ARL－1重组蛋白[ARL－(His)6、ARL－GST]的表达、纯化；c)抗ARL－1抗血清的制备；d)抗ARL－1多克隆抗体的纯化。该抗体可以应用于肝癌的早期诊断从而提高肝癌的早期诊断水平，为肝癌的早期治疗创造条件；同时还作为一种新型、高特异性的载体，为肝癌的导向治疗提供工具。