一种带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法

    公开(公告)号:CN1710078A

    公开(公告)日:2005-12-21

    申请号:CN200510040404.4

    申请日:2005-06-07

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法,是一种单克隆抗体的制备及鉴定方法,其制备的方法为:根据ecp基因全长cDNA序列设计上、下游两条引物进行PCR扩增;用纯化的ECP-GST融合蛋白免疫6~8周龄Balb/c雌鼠;取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞在聚乙二醇作用下进行体外融合,得到抗ECP的单克隆抗体。鉴定的方法为:细胞上清mAb的效价测定:mAb的Ig亚类测定:mAb特异性鉴定:抗原表位的确定:结果表明,此抗体识别的抗原表位在231~300aa这一区段内。利用该抗体可以高效、特异性的在果蝇各组织中检测到ECP蛋白的表达;同时,利用该抗体,在小鼠不同组织中也能检测到阳性信号,具有潜在的广谱性应用价值。

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