激光克服植物自交不亲和性的工艺方法

    公开(公告)号:CN1456044A

    公开(公告)日:2003-11-19

    申请号:CN02144999.6

    申请日:2002-12-18

    Abstract: 一种激光克服植物自交不亲和性的工艺方法,首先采集成熟的花药,在通风干燥的条件下,干燥1-3小时,待花粉开始散出时,对花粉进行激光处理,处理之后在1-5小时之内授粉于成熟的柱头上。该工艺方法简单方便,易于重复,可操作性强。通过激光处理后的花粉,其生物活性提高,并对自交不亲和性强的植物均可不同程度的提高自交亲和率,自交结实率提高幅度较大,结实率可提高20-40%。

    一种指示Nrf2‑Keap1相互作用的BiFC细胞内检测方法及系统

    公开(公告)号:CN107236813A

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201710554366.7

    申请日:2017-07-02

    Inventor: 周波

    CPC classification number: C12Q1/6897 C12N15/85

    Abstract: 本发明公开了一种指示Nrf2‑Keap1相互作用的BiFC细胞内检测方法及系统,提供了与eGFP N端158位氨基酸融合的Nrf2蛋白和与eGFP C端159位氨基酸融合的Keap1蛋白编码基因重组的表达载体,同时转染细胞后,表达的Nrf2与Keap1相互作用,融合的荧光蛋白eGFP的N端和C端重构成完整荧光蛋白。本发明将BIFC系统瞬时转染细胞或构建成稳定表达细胞系,可观察到细胞核中形成的特异信号,该信号可以特异显示并反映活细胞中Nrf2‑Keap1信号通路活性状态及其变化,为通过检测BiFC荧光变化筛选影响Nrf2‑Keap1相互作用的小分子化合物及抗肿瘤药物奠定基础。

    基于重叠延伸PCR法的基因突变、缺失、插入和重组片段的获取方法

    公开(公告)号:CN105907749A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610348835.5

    申请日:2016-05-24

    Inventor: 周波

    CPC classification number: C12Q1/6806 C12Q2533/101 C12Q2525/204 C12Q2531/113

    Abstract: 基于重叠延伸PCR法的基因突变、缺失、插入和重组片段的获取方法,设计2对或3对引物,相邻片段引物的末端含有15bp重叠序列,外引物末端含有酶切位点,利用所设计的引物,加入含有所需融合的基因片段或者质粒DNA为模板,进行平行的完整PCR反应,获得融合位点处含有15个碱基重叠的两组或三组PCR产物,取含有目的片段PCR产物为模板,加入所需融合的全长基因的一对外侧引物,进行二次PCR反应,得到所需融合的目的基因。本发明解决了常规SOE?PCR重叠引物较长,会导致退火温度过高和引物合成时不必要的浪费,有时PCR产物电泳没有条带,也容易产生弥散带、非特异性条带的问题,具有操作简单、快捷、高效的特点。

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