公开(公告)号：CN118147184A

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202410375465.9

申请日：2024-03-29

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王鹏超 ,  刘畅 ,  赵慧哲 ,  谷翔宇 ,  吴宜诺

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12P17/18 ,  C12R1/19

Abstract: 产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用，涉及产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用。本发明通过搭建并优化咖啡因去甲基化基因通路并对咖啡因去甲基化酶还原酶的优化以及合成工艺优化增强其降解咖啡因生产7‑甲基黄嘌呤的能力；同时搭建辅因子循环模块消除咖啡因去甲基化过程中产生的甲醛并提供还原力，进一步提高大肠杆菌的7‑甲基黄嘌呤生产能力并消除潜在的污染物甲醛。通过对高密度发酵和全细胞转化工艺的优化，使7‑甲基黄嘌呤产量达到6.81/L，是目前国外内合成7‑甲基黄嘌呤的最高产量。本发明可获得产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用。

公开(公告)号：CN115976093A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202211110735.0

申请日：2022-09-13

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 刘成伟 ,  韩海燕 ,  王鹏超 ,  夏雪奎 ,  赵佩佩 ,  王佳慧

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/54 ,  C12P7/42 ,  C12R1/69

Abstract: 一种利用米曲霉制备苔色酸的方法，涉及微生物化学技术领域。本发明的目的是为了解决商业化的苔色酸售价高，以及传统的苔色酸制备方法存在纯度低、收率低及合成工艺复杂的问题。方法：以pRA质粒经KpnI酶切线性化处理的片段为载体，将苔色酸合酶编码基因herA的片段一和片段二插入到pRA质粒中，获得表达质粒pRA‑herA；再获得高产苔色酸菌株；将高产苔色酸菌株的菌丝接种于灭菌后的大米培养基中，对培养好的菌体进行萃取、浓缩，获得发酵液浸膏；将发酵液浸膏通过硅胶分离、高效液相色谱仪制备，得到苔色酸。本发明可获得一种利用米曲霉制备苔色酸的方法。

公开(公告)号：CN118109530A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410111850.2

申请日：2024-01-26

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 刘成伟 ,  段应策 ,  张瑞颖 ,  王鹏超 ,  李江豪

IPC: C12P15/00 ,  C12N15/80 ,  C12N15/52 ,  C12N1/15 ,  C12R1/69

Abstract: 一种利用米曲霉制备原伊鲁烷型倍半萜骨架的方法，涉及微生物化学技术领域。本发明的目的是为了解决目前△6‑Protoilludene的制备工艺不能满足商业化需求的问题。本发明以米曲霉(Aspergillus oryzae)为宿主，能够提供丰富的FPP原料来合成△6‑Protoilludene；本发明所用的表达质粒pCP2‑Agr7上携带pAmyB淀粉酶启动子，以大米为培养基时可以高效驱动△6‑Protoilludene合酶编码基因Agr7的高效表达。本发明可获得一种利用米曲霉制备原伊鲁烷型倍半萜骨架的方法。

公开(公告)号：CN115976093B

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202211110735.0

申请日：2022-09-13

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 刘成伟 ,  韩海燕 ,  王鹏超 ,  夏雪奎 ,  赵佩佩 ,  王佳慧

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/54 ,  C12P7/42 ,  C12R1/69

Abstract: 一种利用米曲霉制备苔色酸的方法，涉及微生物化学技术领域。本发明的目的是为了解决商业化的苔色酸售价高，以及传统的苔色酸制备方法存在纯度低、收率低及合成工艺复杂的问题。方法：以pRA质粒经KpnI酶切线性化处理的片段为载体，将苔色酸合酶编码基因herA的片段一和片段二插入到pRA质粒中，获得表达质粒pRA‑herA；再获得高产苔色酸菌株；将高产苔色酸菌株的菌丝接种于灭菌后的大米培养基中，对培养好的菌体进行萃取、浓缩，获得发酵液浸膏；将发酵液浸膏通过硅胶分离、高效液相色谱仪制备，得到苔色酸。本发明可获得一种利用米曲霉制备苔色酸的方法。