公开(公告)号：CN118147184A

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202410375465.9

申请日：2024-03-29

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王鹏超 ,  刘畅 ,  赵慧哲 ,  谷翔宇 ,  吴宜诺

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12P17/18 ,  C12R1/19

Abstract: 产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用，涉及产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用。本发明通过搭建并优化咖啡因去甲基化基因通路并对咖啡因去甲基化酶还原酶的优化以及合成工艺优化增强其降解咖啡因生产7‑甲基黄嘌呤的能力；同时搭建辅因子循环模块消除咖啡因去甲基化过程中产生的甲醛并提供还原力，进一步提高大肠杆菌的7‑甲基黄嘌呤生产能力并消除潜在的污染物甲醛。通过对高密度发酵和全细胞转化工艺的优化，使7‑甲基黄嘌呤产量达到6.81/L，是目前国外内合成7‑甲基黄嘌呤的最高产量。本发明可获得产7‑甲基黄嘌呤基因工程菌株的构建方法及其应用。