公开(公告)号：CN103602682A

公开(公告)日：2014-02-26

申请号：CN201310562507.1

申请日：2013-11-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孔庆然 ,  黄天晴 ,  刘忠华

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种抑制IRS2基因表达的shRNA及应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1。本发明还提供了一种抑制IRS2基因表达的shRNA干扰载体。根据克隆经对比分析后的猪源IRS2基因保守序列，合成带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点干扰片段，并将干扰片段连接到经过BamH Ⅰ和HindⅢ线性化的质粒载体上，经筛选后获得有效干扰载体。本发明提供的shRNA及其干扰载体，能够有效抑制IRS2基因的表达，影响细胞的糖脂代谢，为2型糖尿病模型猪的构建奠定基础。

公开(公告)号：CN103589730B

公开(公告)日：2015-10-21

申请号：CN201310562508.6

申请日：2013-11-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘忠华 ,  仇有文 ,  孔庆然 ,  黄天晴

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种抑制IRS1基因表达的shRNA及应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1。通过与具有IRS2基因的质粒载体进行连接，本发明还提供了一种具有同时敲低猪源IRS1和IRS2基因表达的shRNA干扰载体。猪肝脏细胞IRS基因表达实验的结果显示，shRNA干扰载体分别将猪的IRS1基因和IRS2基因敲低了78%和64%。同时，IRS基因表达水平的敲低对猪肝脏细胞的糖脂代谢产生影响，提高了猪肝脏细胞的血糖浓度。本发明不仅为构建2型糖尿病模型猪奠定基础，还对如何提高猪血糖浓度进行了有益探索。

公开(公告)号：CN103589730A

公开(公告)日：2014-02-19

申请号：CN201310562508.6

申请日：2013-11-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孔庆然 ,  黄天晴 ,  刘忠华

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种抑制IRS1基因表达的shRNA及应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1。通过与具有IRS2基因的质粒载体进行连接，本发明还提供了一种具有同时敲低猪源IRS1和IRS2基因表达的shRNA干扰载体。猪肝脏细胞IRS基因表达实验的结果显示，shRNA干扰载体分别将猪的IRS1基因和IRS2基因敲低了78%和64%。同时，IRS基因表达水平的敲低对猪肝脏细胞的糖脂代谢产生影响，提高了猪肝脏细胞的血糖浓度。本发明不仅为构建2型糖尿病模型猪奠定基础，还对如何提高猪血糖浓度进行了有益探索。