表达高效木聚糖酶重组质粒及重组毕赤酵母菌的构建方法

    公开(公告)号:CN104046649A

    公开(公告)日:2014-09-17

    申请号:CN201410235606.3

    申请日:2014-05-22

    Inventor: 单安山 高赫

    Abstract: 本发明提供一种表达高效木聚糖酶重组质粒及重组毕赤酵母菌的构建方法。根据毕赤酵母密码子的偏好性,优化黑曲霉木聚糖酶基因XynB,连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,并在毕赤酵母GS115中实现了表达。重组酶GS115/pPICZαA-XynBopt的酶活提高1.8倍;用体外串联的方式构建木聚糖酶XynB-opt基因的双拷贝GS115/pPICZαA-(XynBopt)2,并在毕赤酵母GS115中实现了表达。双拷贝木聚糖酶的活性比单拷贝木聚糖酶的活性提高1.9倍。诱导10天后,双拷贝酶活达到15158.23±45.11U/mL。纯化后木聚糖酶酶活为6853.00±20.08U/mg。

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