公开(公告)号：CN108396007B

公开(公告)日：2021-07-23

申请号：CN201810215749.6

申请日：2018-03-15

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张娜 ,  张建涛 ,  迟新宇 ,  陈丹 ,  王伟华 ,  张艳莹 ,  赵锋

IPC: C12N5/071

Abstract: 体外构建奶牛血乳屏障三维模型的方法，包括奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞培养，奶牛静脉内皮细胞培养，免疫荧光鉴定乳腺上皮细胞和内皮细胞，Transwell共培养，联合培养基的配制中以催乳素、胰岛素、表皮生长因子、牛生长激素、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子作为与乳腺上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞生长相关的激素和细胞因子；最后在transwell小室接种上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞，从而成功构建了奶牛血乳屏障模型。本发明能够实时、有效的研究营养物质、药物和有毒物质进入乳腺组织和乳中分子机制，不仅填补了国内外空白，还为研究脂类、维生素、药物和有毒物质等穿过血乳屏障的分子机制提供研究平台。

公开(公告)号：CN108396007A

公开(公告)日：2018-08-14

申请号：CN201810215749.6

申请日：2018-03-15

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张娜 ,  张建涛 ,  迟新宇 ,  陈丹 ,  王伟华 ,  张艳莹 ,  赵锋

IPC: C12N5/071

Abstract: 体外构建奶牛血乳屏障三维模型的方法，包括奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞培养，奶牛静脉内皮细胞培养，免疫荧光鉴定乳腺上皮细胞和内皮细胞，Transwell共培养，联合培养基的配制中以催乳素、胰岛素、表皮生长因子、牛生长激素、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子作为与乳腺上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞生长相关的激素和细胞因子；最后在transwell小室接种上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞，从而成功构建了奶牛血乳屏障模型。本发明能够实时、有效的研究营养物质、药物和有毒物质进入乳腺组织和乳中分子机制，不仅填补了国内外空白，还为研究脂类、维生素、药物和有毒物质等穿过血乳屏障的分子机制提供研究平台。

公开(公告)号：CN110408579A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910476723.1

申请日：2019-06-03

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张建涛 ,  张娜 ,  李月 ,  迟新宇 ,  刘涛 ,  高利

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/66 ,  A23K10/18 ,  A23K50/10 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及牛白细胞介素-2重组乳酸菌及其应用。BoIL-2基因与载体pNZ8148连接，构建pNZ8148-BoIL-2表达载体，将pNZ8148-BoIL-2表达载体转化到大肠杆菌MC1061感受态细胞，进行质粒的克隆扩增，利用电转化的方法将质粒pNZ8148-BoIL-2转化到乳酸乳球菌NZ9000中，并诱导其表达。本申请所述的重组乳酸菌L.lactis NZ9000/pNZ8148-BoIL-2能够表达有生物活性的牛IL-2，可以稳定传代20代，能够提高动物机体免疫功能，增强动物机体抵抗力，减少疾病的发生。