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公开(公告)号：CN107167598A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710292036.5
申请日：2017-04-28
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/559 , G01N33/569
CPC classification number: G01N33/559 , G01N33/56916
Abstract: 本发明公开了一种快速检测阪崎克罗诺杆菌的试剂盒及其应用，属于微生物检测技术领域。本发明试剂盒包括酶标孔、信号增强型试纸条、第一金标抗体和第二金标抗体；信号增强型试纸条的检测线上包被有抗阪崎克罗诺杆菌捕获抗体，控制线上包被有羊抗鼠二抗；第一金标抗体上包被有抗阪崎克罗诺杆菌检测抗体，且由BSA封闭结合位点；第二金标抗体上包被有抗BSA抗体；第一金标抗体和第二金标抗体结合形成双金标抗体。本发明的试剂盒灵敏度高，较传统型试纸条灵敏度提高了100倍，稳定性好，特异性强，检测时间短，制作简便且成本低，方便携带，为现场快速检测阪崎克罗诺杆菌提供了有效工具。
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公开(公告)号：CN106011247A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610382167.8
申请日：2016-06-01
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种婴幼儿配方乳粉中细菌的溯源方法，其步骤为：对婴幼儿配方乳粉原辅料、生产环境中的细菌进行分离；对分离菌株进行DNA的提取；利用通用引物FA‑27F：5'‑AGTCTCTGATCATGCCTCAG‑3'和RA‑1492R：5'‑AAGGAGGTGCTCCAGCC‑3'，进行16S rDNA序列的PCR扩增，扩增产物在1％的琼脂糖凝胶电泳上进行检测；对步骤(3)16S rDNA序列PCR扩增产物进行测序；将获得菌株的16S rRNA基因序列利用DNAStar中的MEGA软件构建系统发育树，通过发育树分析达到对婴幼儿配方乳粉中的细菌进行溯源的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106591492A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611193008.X
申请日：2016-12-21
Applicant: 东北农业大学
CPC classification number: C12Q1/6804 , C12Q1/689 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625 , C12Q2522/101 , C12Q2563/131
Abstract: 本发明公开了一种LAMP检测试剂盒及应用，属于生物技术领域。本发明提供的试剂盒包括LAMP扩增反应体系和胶体金试纸条；所述LAMP扩增反应体系包括LAMP引物组、LAMP扩增反应液；所述LAMP引物组包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，环引物LF和LB；所述LAMP扩增反应液含有Taq SSB蛋白，Bst DNA聚合酶，Bst buffer，dNTPs，Mg2+，模板和ddH2O本发明试剂盒操作简单、检测成本低、检测时间短、特异性好、灵敏度高，能够防止引物产生多聚体现象，降低或阻止引物二聚体的产生，防止假阳性的产生，同时提高LAMP反应的扩增效率。
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公开(公告)号：CN105950744A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610382169.7
申请日：2016-06-01
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6858 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明提供一种婴儿配方奶粉中克罗诺杆菌的溯源方法，该方法利用多位点序列分型技术，对PIF原料、半成品、成品及其加工环境的克罗诺杆菌进行分子分型研究，揭示其种群特征，明确克罗诺杆菌的系统发育关系，并通过生物信息学对克罗诺杆菌进行系统发育分析，从而系统的揭示上述环境中克罗诺杆菌的遗传特征；在克罗诺杆菌MLST分型的基础上，以该致病菌的ST和环境来源为变量进行相关性分析，确定PIF加工过程中最易污染克罗诺杆菌的关键环节和分布规律，从而追溯婴儿配方奶粉中克罗诺杆菌的来源。从而实现从根本上监控PIF生产过程，保证PIF质量的目的。
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公开(公告)号：CN109669039A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201710957730.4
申请日：2017-10-16
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开了一种快速检测阪崎克罗诺杆菌的增敏试纸条及其应用，属于阪崎克罗诺杆菌检测技术领域。本发明增敏试纸条包括样品垫，金标垫，NC膜，吸水垫和底板，其中：NC膜上设有检测线和控制线，控制线上包被有羊抗鼠二抗，检测线上包被的检测线溶液是通过将胶体金与抗阪崎克罗诺杆菌捕获抗体进行孵育获得的。本发明试纸条具有可提高NC膜上蛋白质结合量的特点，进而增强捕获率，而且在检测线处加入的胶体金可以提高聚集显色，从而提高检测效果，较传统试纸条灵敏度提高了100倍，特异性强，检测时间短，制作简便且成本低，方便携带，适用于现场检测阪崎克罗诺杆菌。
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公开(公告)号：CN109593837A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201710904697.9
申请日：2017-09-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于磁捕获的纳米金比色法快速检测阪崎克罗诺杆菌的方法，属于食品安全技术领域。该方法是将待检物质中的菌体细胞进行破碎处理释放出DNA，萃取除杂后获得粗提DNA溶液，向粗提DNA溶液中加入氨基磁珠，孵育捕获DNA；建立阪崎克罗诺杆菌特异性PCR反应，以捕获的DNA为模板进行PCR扩增；设计阪崎克罗诺杆菌的DNA探针，将胶体金与DNA探针进行孵育，然后进行老化获得胶体金探针，将PCR产物与胶体金探针混合杂交，加入MgSO4溶液观察颜色变化。本发明方法步骤简单，特异性好，用时较短，可以实现快速检测，无需抗体等昂贵试剂，成本低。本发明适用于快速检测食品中的阪崎克罗诺杆菌。
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公开(公告)号：CN107167598B
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201710292036.5
申请日：2017-04-28
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/559 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种快速检测阪崎克罗诺杆菌的试剂盒及其应用，属于微生物检测技术领域。本发明试剂盒包括酶标孔、信号增强型试纸条、第一金标抗体和第二金标抗体；信号增强型试纸条的检测线上包被有抗阪崎克罗诺杆菌捕获抗体，控制线上包被有羊抗鼠二抗；第一金标抗体上包被有抗阪崎克罗诺杆菌检测抗体，且由BSA封闭结合位点；第二金标抗体上包被有抗BSA抗体；第一金标抗体和第二金标抗体结合形成双金标抗体。本发明的试剂盒灵敏度高，较传统型试纸条灵敏度提高了100倍，稳定性好，特异性强，检测时间短，制作简便且成本低，方便携带，为现场快速检测阪崎克罗诺杆菌提供了有效工具。
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