公开(公告)号：CN101914627A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010267606.3

申请日：2010-08-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  吕学娜 ,  王明娜 ,  韩琳琳 ,  张光辉 ,  满朝新 ,  刘颖 ,  曲行光

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/53

Abstract: 一种评价嗜酸乳杆菌免疫调节作用的方法，涉及一种评价免疫调节作用的方法。方法：一、将待评价的嗜酸乳杆菌培养到对数生长后期，制得菌悬液；二、将极化状态的人结肠腺癌细胞Caco-2与菌悬液共同孵育；三、采用Trizol法抽提孵育后的人结肠腺癌细胞Caco-2的总RNA，再提取蛋白质；四、利用Real Time RT-PCR法和Western blot法对免疫调节相关基因的表达情况分别在总RNA和蛋白质水平进行检测和比对即可。本发明通过对免疫调节相关基因的检测，可以更加客观的评价嗜酸乳杆菌对宿主可能产生的不良炎症反应等，以排除其潜在的致病危险。

公开(公告)号：CN101787389A

公开(公告)日：2010-07-28

申请号：CN200910217427.6

申请日：2009-12-25

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  赵凤 ,  曲行光 ,  吕学娜 ,  薛玉清 ,  谢鲲昊 ,  杨士芹 ,  姚丽燕

IPC: C12Q1/14 ,  C12Q1/06

Abstract: 预测乳中金黄色葡萄球菌生长和产毒的方法，它涉及一种利用预测微生物学原理预测金黄色葡萄球菌生长和产毒的方法。本发明解决了现有检测乳中金黄色葡萄球菌菌数和金黄色葡萄球菌肠毒素的方法操作复杂、检测时间长的问题。方法：1.根据y＝7.1917×10-5×T2+0.022782×T-0.32889得到最大生长速率；2.根据log N(t)＝A+C[exp(-exp(-y(t-M)))]得到菌数；3.将菌数106.4cfu/mL所对应的时间t，结合F＝0.0018543×T2-0.050277×T+0.32629得到的产毒速率，即实现了金黄色葡萄球菌生长和产毒的预测。本发明方法操作简单、检测时间短。

公开(公告)号：CN101735994A

公开(公告)日：2010-06-16

申请号：CN200910217470.2

申请日：2009-12-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  姚丽燕 ,  曲行光 ,  韩希妍 ,  张光辉 ,  赵凤 ,  周艳秋

IPC: C12N9/76 ,  C12N15/57 ,  C12N15/74

Abstract: 一种在乳酸乳球菌中表达牛胰蛋白酶的方法，它涉及一种表达牛胰蛋白酶的方法。解决了现有牛胰蛋白酶目前还不能在乳酸乳球菌中表达的问题。方法：将野生型牛胰蛋白酶N端的8个密码子和所有编码Leu和Ary的稀有密码子替换为乳酸乳球菌的偏爱密码子，得人工合成牛胰蛋白酶基因，并引入识别序列，然后与pUC57连接转化DH5α，筛选阳性转化子pUC57-trym，再与表达载体pSEC-E7同时双酶切后，回收所需目的片段，连接并构建重组表达载体pSEC-trym，电转化转入乳酸乳球菌NZ9000，厌氧培养后经乳链菌肽Nisin诱导，即完成。本发明使人工合成牛胰蛋白酶成功地在乳酸乳球菌中进行表达，且具有生物学活性。