公开(公告)号：CN1974788A

公开(公告)日：2007-06-06

申请号：CN200510127340.1

申请日：2005-12-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李继昌 ,  霍贵成 ,  张铁男

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明提供的是一种牛奶中致泻性大肠杆菌PCR快速检测试剂盒及其制备方法。试剂盒的组成包括：10×PCR buffer：5.0μl、10mM dNTP：1.0μl、25mM MgCl2：3.0μl、终浓度各1、0.5、1uM引物P1(eaeA、ipaH、ST)各：1.0μl、终浓度各1、0.5、1uM引物P2(eaeA、ipaH、ST)各：1.0μl、DNA模板：5.0μl、ddH2O：29.5μl、TaqDNA聚合酶(5U/Ll)：0.5μl、Total：50.0μl。PCR反应条件为：95℃预变性5min；94℃变性40s，51.3℃退火40s，72℃延伸1min，进行30个循环；72℃延伸10min。本发明具有检测速度快、检出率高、灵敏度高等优点。

公开(公告)号：CN101701242A

公开(公告)日：2010-05-05

申请号：CN200910310495.7

申请日：2009-11-26

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘宁 ,  安美忱 ,  张铁男

IPC: C12P21/06 ,  C07K1/18 ,  C07K1/20

Abstract: 一种牛乳铁蛋白素的分离方法，它涉及一种乳铁蛋白素的分离方法。它解决了现有分离乳铁蛋白素的方法存在分离后得到的乳铁蛋白素纯度低、成本高及安全性差的问题。分离方法：一、制备上清液；二、采用离子交换层析方法分离上清液；三、采用反相层析方法分离，即可分离出牛乳铁蛋白素。本发明分离出的牛乳铁蛋白素经测得纯度高达90％～92％。本发明分离出的牛乳铁蛋白素相对分子量为3124.89Da。本发明工艺简单、设备简单且成本低廉，本发明安全性好。

公开(公告)号：CN100540679C

公开(公告)日：2009-09-16

申请号：CN200510127340.1

申请日：2005-12-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李继昌 ,  霍贵成 ,  张铁男

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明提供的是一种牛奶中致泻性大肠杆菌PCR快速检测试剂盒及其制备方法。试剂盒的组成包括：10×PCR buffer 5.0μl，10mM dNTP 1.0μl，25mM MgCl23.0μl，终浓度各1、0.5、1uM引物P1(eaeA、ipaH、ST)各 1.0μl，终浓度各1、0.5、1uM引物P2(eaeA、ipaH、ST)各 1.0μl，DNA模板 5.0μl，ddH2O 29.5μl，TaqDNA聚合酶(5U/Ll) 0.5μl，Total 50.0μl，PCR反应条件为：95℃预变性5min；94℃变性40s，51.3℃退火40s，72℃延伸1min，进行30个循环；72℃延伸10min。本发明具有检测速度快、检出率高、灵敏度高等优点。