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发明公开
一种猪CAR激动剂的高通量筛选方法无效

公开(公告)号：CN102321732A

公开(公告)日：2012-01-18

申请号：CN201110221908.1

申请日：2011-07-26

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 石宝明 , 娄蕾 , 单安山

IPC: C12Q1/66 , C12Q1/02 , C12N15/12 , C12N15/79 , C12N5/10 , G01N21/64

Abstract: 本项发明涉及一种猪CAR激动剂的高通量筛选方法，属于农业畜牧兽医应用领域。本发明的高通量筛选方法通过猪肝脏总RNA提取、RT-PCR得到的pgCAR基因片段与真核表达质粒连接和(NR1)5-TK promotor全基片段与报告质粒连接，然后将重组表达质粒、重组报告质粒及内参报告质粒共转染哺乳动物细胞形成稳定细胞株，再向稳定细胞株中加入待筛选的药物，测定报告基因的表达水平，评估药物的生物活性，将生物活性高的药物选出，得到pgCAR激动剂。本发明所建立的细胞筛选模型操作简单易行，具有很好的特异性和敏感性，能够高效、快速、准确地发现猪CAR的激动剂。

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