公开(公告)号：CN107974461A

公开(公告)日：2018-05-01

申请号：CN201810048426.2

申请日：2018-01-18

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 任桂萍 ,  李德山 ,  刘春香 ,  王宇阳

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12N15/13

CPC classification number: C12N15/79 ,  C07K16/2863 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种高效表达anti-hEGFR基因的真核表达载体构建方法，属于分子生物学领域。针对重组人表皮生长因子受体抗体(anti-hEGFR)基因的克隆及高效真核表达载体构建，以含anti-hEGFR全长基因的质粒为模板，设计引物克隆抗体轻链及重链，在真核表达载体上插入了IgKappa Leader和IRES EGFP来增强蛋白表达及方便后续分选实验，经过上述方式成功获得真核表达的蛋白anti-hEGFR，其将在治疗EGFR过表达引起的癌症方面发挥显著效果。

公开(公告)号：CN108220244A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201810048430.9

申请日：2018-01-18

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 任桂萍 ,  李德山 ,  张胜奇 ,  刘春香

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C07K16/28 ,  C12Q1/02

CPC classification number: C12N5/0682 ,  C07K16/2863 ,  C12N15/85 ,  C12N2510/02 ,  G01N33/5005

Abstract: 本发明公开了一种含重组人表皮生长因子受体抗体基因的CHO细胞株、筛选方法及其生产工艺。本发明提供了一种重组人表皮生长因子受体抗体基因，并将携带重组人表皮生长因子受体抗体基因的真核表达载体转染进入CHO‑K1细胞，利用流式细胞仪多次筛选得到高表达重组人表皮生长因子受体抗体的细胞，并建立细胞株的生产工艺。本发明提供的含重组人表皮生长因子受体抗体基因的CHO细胞株所表达的重组蛋白可对多种癌细胞表面的EGFR配体结合位点进行封闭，从而削弱或阻断EGFR下游的信号传导，达到抑制肿瘤的生长和侵袭，促进细胞凋亡的目的。在治疗EGFR过表达引起的癌症方面具有很大的应用价值，对于EGFR过表达引起的癌症治疗具有重大应用价值。