公开(公告)号：CN101525589A

公开(公告)日：2009-09-09

申请号：CN200910071262.6

申请日：2009-01-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘敏 ,  李一经 ,  赵丽丽 ,  赵永欣 ,  刘巍巍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/34 ,  C12N15/74 ,  C12R1/245

Abstract: 本发明提供的是一种表达传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreas necrosis virus，IPNV)VP3蛋白的重组干酪乳杆菌及制法。根据传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有IPNV VP3基因主要抗原位点的618bp目的片段，将扩增得到的IPNVVP3基因与表面表达的载体质粒pPG1进行连接，通过电转化进入宿主菌干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393细胞内，含阳性重组质粒pPG1－IPNV VP3的干酪乳杆菌命名为pPG1－IPNV VP3/L.casei 393。将重组pPG1－IPNV VP3/L.casei 393在乳糖的诱导下进行表达。本发明中构建了传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白干酪乳杆菌表达载体系统，表达了含有IPNV VP3蛋白主要抗原位点的约31KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与IPNV免疫血清发生反应，表明重组VP3蛋白与IPNV天然抗原一样具有相同的抗原性。