公开(公告)号：CN108192927A

公开(公告)日：2018-06-22

申请号：CN201711477506.1

申请日：2017-12-29

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 陈红林 ,  王军 ,  王成辉

IPC: C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及生物技术，特别是涉及一种瓯江彩鲤的基因编辑与过表达操作方法。本发明提供一种瓯江彩鲤的选育方法，包括：将适量的瓯江彩鲤的精子与卵子混合，撒入水中；待卵子沉落、粘附至位于水中的培养容器中；取出培养容器，冲洗卵子，保持卵子位于适量的水中；去除未受精的卵子；将受精卵子注射用于抑制tyrp1基因的CRISPR cas9基因编辑系统和/或过表达ASIP基因的Tol2转座系统；培育所得受精卵子；将培育所得幼鱼进行筛选。本发明所提供的对经济鱼类—瓯江彩鲤受精卵进行基因敲除与过表达试验，首次在瓯江彩鲤“大花”体色中对黑色素相关基因成功进行了敲除与过表达操作，繁育出瓯江彩鲤四种体色类型的纯系能够将体色稳定遗传给下一代。

公开(公告)号：CN117448386A

公开(公告)日：2024-01-26

申请号：CN202310879036.0

申请日：2023-07-18

Applicant: 上海海洋大学 ,  浙江省农业科学院

Inventor： 陈红林 ,  陈晓雯 ,  王军 ,  王成辉

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/53 ,  A01K67/0276

Abstract: 一种TYRP1基因编辑“大花”瓯江彩鲤的制备方法，属于分子生物学技术领域。本发明具体包括：(1)亲鱼的筛选；(2)SgRNA模板合成与体外转录；(3)瓯江彩鲤人工授精与布板和(4)显微注射。本发明应用CRISPR/Cas9基因编辑技术，敲除“大花”瓯江彩鲤的三个TYRP1基因，制备了TYRP1基因缺陷型的棕色版块瓯江彩鲤突变体，本发明通过本发明限定的方法在原代获得高度突变模型，缩短获得纯合突变体的时间，对鱼类体色相关基因的进化研究意义重大。