公开(公告)号：CN105524932A

公开(公告)日：2016-04-27

申请号：CN201510859994.7

申请日：2015-11-30

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 杨志刚 ,  魏帮鸿 ,  施秋燕 ,  姚琴琴 ,  杨青 ,  刘青 ,  成永旭 ,  王健懿 ,  杨筱珍

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10

Abstract: 中华绒螯蟹的delta6去饱和酶基因及其克隆方法，该方法包括步骤：(1)根据Genebank中华绒螯蟹和菁夜蛾的delta6去饱和酶基因进行对比，获得保守序列，设计保守区序列引物FAD6-F1(+)/FAD6-R1(-)，以中华绒螯蟹肝胰腺总RNA反转录合成的cDNA第一链为模板，进行PCR反应，获得delta6去饱和酶基因片段核心片段，将核心片段克隆到载体上并测序；(2)根据获得的delta6去饱和酶基因核心片段设计5’-和3’-RACE引物，FAD6-5’(-)和FAD6-3’(+)，以中华绒螯蟹肝胰腺总RNA反转录合成的5’-cDNA和3’-cDNA为模板，进行RACE反应，获得5’和3’末端片段，将得到的该片段分别连接至载体后克隆并测序；(3)将5’和3’末端片段分别与获得的delta6去饱和酶基因核心片段进行拼接得到delta6去饱和酶基因全长序列。