一种基于单根生精小管灌注的睾丸组织冻存方法

    公开(公告)号:CN111937862A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN202010911926.1

    申请日:2020-09-02

    Abstract: 本发明涉及一种基于单根生精小管灌注的睾丸组织冻存方法,包括步骤:先将睾丸组织制成单根生精小管,然后将单根生精小管置于冻存保护剂1中浸泡10min,再使用冻存保护剂2对生精小管浸泡和灌注,实现玻璃化降温的同时最大程度地减少保护剂的渗透损伤,接着将灌注后的生精小管迅速转移至Cryo-piece单精子冻存薄片上,套入Cryo-tubule后直接浸入液氮中进行快速降温,降温后迅速置于复苏液中浸泡。相较于传统睾丸细胞悬液冻存方法本发明方法优点为:(1)保留了生精小管的完整结构;(2)有效减少睾丸细胞的氧化应激水平;(3)有效减少冻存后大量精原细胞和支持细胞的死亡;(4)生精小管内精子的回收率和活性高。

    一种适用于单根生精小管微流控冷冻培养装置

    公开(公告)号:CN115595264B

    公开(公告)日:2025-04-15

    申请号:CN202110767052.1

    申请日:2021-07-07

    Abstract: 本发明涉及一种适用于单根生精小管微流控冷冻培养装置,包括双通道微流控芯片,所述的双通道微流控芯片可分为上层腔体芯片和下层腔体芯片,且所述的上层腔体芯片和下层腔体芯片之间设置有一半透膜,所述的上层腔体的上表面上设置有两个上层液体出入口,所述的下层腔体芯片中设置有多个相同的独立单元,且所述的独立单元为长行槽,所述的长行槽内设置有均匀排列的若干齿槽,且每个齿槽呈间隔设置;所述长行槽内的两侧还设置有微注射固定针;其优点表现在:本发明通过微流控芯片及微灌注通道实现管腔内外差异化灌注(包括冷冻保护剂及培养液)及管腔内干预因子微灌注调控,从而实现生精小管的长期培养及生精微环境的调控,改善生精功能。

    一种适用于单根生精小管微流控冷冻培养装置

    公开(公告)号:CN115595264A

    公开(公告)日:2023-01-13

    申请号:CN202110767052.1

    申请日:2021-07-07

    Abstract: 本发明涉及一种适用于单根生精小管微流控冷冻培养装置,包括双通道微流控芯片,所述的双通道微流控芯片可分为上层腔体芯片和下层腔体芯片,且所述的上层腔体芯片和下层腔体芯片之间设置有一半透膜,所述的上层腔体的上表面上设置有两个上层液体出入口,所述的下层腔体芯片中设置有多个相同的独立单元,且所述的独立单元为长行槽,所述的长行槽内设置有均匀排列的若干齿槽,且每个齿槽呈间隔设置;所述长行槽内的两侧还设置有微注射固定针;其优点表现在:本发明通过微流控芯片及微灌注通道实现管腔内外差异化灌注(包括冷冻保护剂及培养液)及管腔内干预因子微灌注调控,从而实现生精小管的长期培养及生精微环境的调控,改善生精功能。

    一种海绵体纤维化疾病模型建立方法

    公开(公告)号:CN114807022B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202210316290.5

    申请日:2022-03-29

    Abstract: 本发明涉及一种海绵体纤维化疾病模型建立方法,包括以下步骤:(1)海绵体内皮细胞的分离及XMU‑MP‑1处理;(2)细胞爬片免疫荧光染色;(3)海绵体组织体外培养及XMU‑MP‑1处理;(4)海绵体组织石蜡切片Masson染色;(5)大鼠在体海绵体XMU‑MP‑1处理,得到所需内皮‑间充质转化介导的海绵体纤维化大鼠模型。本发明填补了目前缺乏由于内皮‑间充质转化导致的海绵体纤维化模型的空白,极大地方便对于这一现象的体内、外实验的开展。本发明使用的XMU‑MP‑1针对海绵体成纤维细胞的Hippo通路进行激活,对其他导致海绵体纤维化的生物过程,如成纤维‑肌成纤维转化、成纤维细胞增殖等影响较小,具有靶点专一性。所以,针对内皮‑间充质转化这一生物过程,使用本发明造模可排除上述干扰。

    一种海绵体纤维化疾病模型建立方法

    公开(公告)号:CN114807022A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210316290.5

    申请日:2022-03-29

    Abstract: 本发明涉及一种海绵体纤维化疾病模型建立方法,包括以下步骤:(1)海绵体内皮细胞的分离及XMU‑MP‑1处理;(2)细胞爬片免疫荧光染色;(3)海绵体组织体外培养及XMU‑MP‑1处理;(4)海绵体组织石蜡切片Masson染色;(5)大鼠在体海绵体XMU‑MP‑1处理,得到所需内皮‑间充质转化介导的海绵体纤维化大鼠模型。本发明填补了目前缺乏由于内皮‑间充质转化导致的海绵体纤维化模型的空白,极大地方便对于这一现象的体内、外实验的开展。本发明使用的XMU‑MP‑1针对海绵体成纤维细胞的Hippo通路进行激活,对其他导致海绵体纤维化的生物过程,如成纤维‑肌成纤维转化、成纤维细胞增殖等影响较小,具有靶点专一性。所以,针对内皮‑间充质转化这一生物过程,使用本发明造模可排除上述干扰。

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