公开(公告)号：CN109957541A

公开(公告)日：2019-07-02

申请号：CN201711412252.5

申请日：2017-12-23

Applicant: 上海市第一人民医院

Inventor： 王洋 ,  金羽青 ,  沈华 ,  沈尊理

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/079 ,  A61L27/38

Abstract: 本发明属于生物学领域/组织工程，涉及一种组织工程神经种子细胞的构建方法及用途。本发明利用Dispase II分离纯化许旺细胞以及成纤维细胞，将构建的种子细胞用于构建组织工程神经，置入神经导管复合成神经移植物，进一步用于神经缺损的修复，本发明提供了一种获取相对简单，效果良好的种子细胞的方法，外周神经成纤维细胞取材容易，体外扩增能力强，与许旺细胞联合使用移植后具有良好的促进神经再生的效果，并且明显减少的许旺细胞的用量；修复后再生的神经直径较粗，无神经瘤形成；本方法尤其适用于组织工程神经生物材料中添加的种子细胞，具有应用前景和市场价值。

公开(公告)号：CN102899290A

公开(公告)日：2013-01-30

申请号：CN201110216913.3

申请日：2011-07-29

Applicant: 上海市第一人民医院

Inventor： 王晓盼 ,  沈尊理 ,  秦金保 ,  金羽青

IPC: C12N5/079 ,  A61L27/38

Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种培养成年小鼠坐骨神经许旺细胞的方法。本发明还包括经过纯化过程获得更高的纯度的许旺细胞的方法。获得的许旺细胞纯度达到91％，再纯化后其纯度高达98％，结果表明，由于体外的预变性促进了许旺细胞的增殖从而抑制了成纤维的增值，能获得有较高的纯度的许旺细胞。本发明方法通过体外预变性的坐骨神经培养及纯化步骤，能简单、有效的获取大量、高纯度的许旺细胞，为损伤神经修复提供了丰富、优质的许旺细胞，可用于在组织工程中作为神经种子细胞。

公开(公告)号：CN105907716A

公开(公告)日：2016-08-31

申请号：CN201610296462.1

申请日：2016-05-06

Applicant: 上海市第一人民医院

Inventor： 王刚阳 ,  沈尊理 ,  蔡郑东 ,  华莹奇 ,  马政文 ,  金羽青 ,  沈华 ,  曹玲玲

IPC: C12N5/079

CPC classification number: C12N5/0622

Abstract: 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种从成年猕猴周围神经中分离、纯化雪旺细胞的方法，包括下述步骤：第一步，神经的获取及体外预变性：无菌情况下取成年猕猴腓肠和腓总神经段，去除神经外膜，采用含有复合因子的SCCM预变培养基培养获得成年猕猴腓肠神经；第二步，细胞的原代培养：NB4和dispase混合消化神经，离心后，重悬于含有SCCM的laminin的培养皿中，孵育；第三步，雪旺细胞的纯化：将细胞孵育后，加入dispase消化后收集细胞悬液，在含有Ara?C纯化培养液进行孵育；然后纯化、离心后种植在含有SCCM的生长培养基中。预变性时加入细胞增殖因子提高细胞产量，缩短纯化时间，获得高纯度的成年动物雪旺细胞。