公开(公告)号：CN101654675A

公开(公告)日：2010-02-24

申请号：CN200910053876.1

申请日：2009-06-26

Applicant: 上海大学

Inventor： 吉永华 ,  左小潘 ,  周智磊 ,  杨宏天 ,  姜峰

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C12P19/34

Abstract: 本发明涉及一种东亚钳蝎的电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法。本发明的一种电压门控钠通道基因具有SEQ NO 1所示的碱基序列，其编码蛋白具有SEQ NO 2所示的氨基酸序列。该电压门控钠通道基因的克隆方法的具体步骤为：首先从东亚钳蝎的腹神经纤维中提取总RNA；然后用Superscript II反转录酶和Oligo-(dT)引物合成单链cDNA；最后借鉴昆虫Para钠通道的保守氨基酸残基设计退火引物，再采用兼并PCR以及cDNA末端的快速扩增技术，得到全长cDNA。本发明利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)，兼并PCR(Nested-PCR)以及cDNA末端的快速扩增(RACE)技术，得到了东亚钳蝎的全长cDNA。另通过突变实验以及电生理记录检验了突变体对特异性钠通道调制剂BmKI的敏感性，证明该新型钠通道基因可作为膜离子通道调制剂作用机制的研究模板。

公开(公告)号：CN1952139A

公开(公告)日：2007-04-25

申请号：CN200610116385.3

申请日：2006-09-21

Applicant: 上海大学

Inventor： 吉永华 ,  左小潘 ,  贺明 ,  刘志睿

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435

Abstract: 本发明涉及一种东亚钳蝎的电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法。本发明的一种电压门控钠通道基因，具有SEQ NO 1所示的碱基序列。该电压门控钠通道基因的编码蛋白，具有SEQ NO 2所示的氨基酸序列。该电压门控钠通道基因的克隆方法的具体步骤为：首先从东亚钳蝎的腹神经纤维中提取总RNA；然后用Superscript II反转录酶和Oligo－(dT)引物合成单链cDNA；最后借鉴昆虫Para钠通道的保守氨基酸残基设计退火引物，再采用兼并PCR以及cDNA末端的快速扩增技术，得到全长cDNA。本发明利用逆转录聚合酶链式反应(RT－PCR)，兼并PCR(Nested－PCR)以及cDNA末端的快速扩增(RACE)技术，得到了东亚钳蝎的全长cDNA。用于电压门控钠通道的表达及药理调制机制的研究，并为离子通道病的防治和进一步开发为医药品奠定基础。

公开(公告)号：CN1952138A

公开(公告)日：2007-04-25

申请号：CN200610116384.9

申请日：2006-09-21

Applicant: 上海大学

Inventor： 吉永华 ,  左小潘 ,  刘志睿 ,  贺明

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435

Abstract: 本发明涉及一种蜘蛛电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法。本发明的一种蜘蛛电压门控钠通道基因，具有SEQ NO 1所示的碱基序列；其编码蛋白具有SEQ NO 2所示的氨基酸序列。该电压门控钠通道基因的克隆方法的具体步骤为：首先从蜘蛛胸神经索中提取总RNA；再用Superscript II反转录酶和Oligo－(dT)引物合成单链cDNA；最后借鉴昆虫Para钠通道的保守氨基酸残基设计退火引物，再采用兼并PCR以及cDNA末端的快速扩增技术，得到全长cDNA。本发明利用逆转录聚合酶链式反应(RT－PCR)，兼并PCR(Nested－PCR)以及cDNA末端的快速扩增(RACE)技术，得到了虎纹捕鸟蛛电压门控钠通道的全长cDNA。用于电压门控钠通道的表达及药理调制机制的研究，并为离子通道病的防治和进一步开发为医药品奠定基础。